压力蒸汽灭菌器检测技术规范
压力蒸汽灭菌是医疗卫生、实验室及工业领域确保无菌状态的核心手段。其灭菌效果的可靠性直接关系到安全与质量。为确保设备性能稳定、灭菌效果达标，必须遵循科学、规范的检测流程与方法。本指南详细阐述检测要点与技术规范。
一、 检测依据与标准
检测工作需严格遵循现行有效的国家及行业强制性标准，主要包括：
- 物理参数检测： 依据相关压力容器安全技术规范及灭菌器性能标准，对温度、压力、时间等进行计量校准。
- 灭菌效果检测： 遵循医疗器械灭菌相关标准和消毒技术规范，采用物理、化学、生物综合方法验证无菌保证水平（SAL）。
二、 核心检测内容与方法
检测涵盖设备性能、灭菌程序有效性及监测系统可靠性。
-
物理参数检测与设备性能验证：
- 仪表校准： 定期对灭菌器自带的温度、压力、时间显示仪表进行计量校准或验证，确保其读数准确可靠。通常使用经过更高精度计量标准器校准的温度压力验证仪进行比对。
- 温度分布测试（空载/满载）：
- 空载热分布： 在灭菌室内均匀布点放置温度传感器（通常≥10个，包括最难灭菌点如排气口附近、底层角落），运行灭菌程序。评估各点温度达到设定值的时间、维持时间的稳定性及腔室内最大温差（通常要求≤±1℃至±2℃）。验证灭菌室自身加热的均匀性。
- 满载热分布： 在满载标准测试包或实际负载（需记录负载类型）条件下重复测试。评估负载对热分布的影响，确保整个负载内的温度均能达到并维持灭菌要求。
- 压力测试： 验证灭菌器在额定工作压力下的密封性、安全阀起跳压力及安全泄压装置的有效性，确保设备运行安全。
- 真空系统测试（适用预真空型）： 对预真空和脉动真空灭菌器，需精确测量并验证其达到的真空度、真空速率以及真空维持能力（泄漏率测试），这对去除冷空气、确保蒸汽穿透至关重要。
- Bowie-Dick (B-D) 测试（专用于预真空/脉动真空型）：
- 目的： 专门检测真空灭菌器在空载条件下，灭菌室及管路系统内是否存在冷空气团（气锁）或蒸汽穿透障碍。是预真空/脉动真空灭菌器每日或每批次灭菌前必做的测试。
- 方法： 将专用的B-D测试包（内有特殊设计的化学指示图）水平置于灭菌室底层靠近排气口上方（最难灭菌位置），运行专门的短时B-D测试程序（通常在134℃下运行3.5-4分钟）。
- 结果判读： 测试完成后，观察指示图颜色变化。均匀一致的颜色变化（如从米白色变为均匀的深棕色/黑色）表示测试通过，冷空气排除有效且蒸汽分布均匀。任何局部变色不均均表示测试失败，提示设备存在故障（如真空泵效率低、管路泄漏、蒸汽质量差等），必须检修，在故障排除前不得用于灭菌。
-
化学指示物检测：
- 原理： 利用对特定灭菌关键参数（主要是温度，有时结合时间或蒸汽）敏感的化学物质，发生不可逆的物理或化学变化（如颜色改变、染料移动）。
- 应用：
- 过程指示物（包外指示物）： 粘贴于包裹或容器外部。颜色变化仅表明该物品经过了灭菌过程，不能证明已达到无菌。主要用于区分已灭菌和未灭菌物品。
- 特定参数指示物（包内指示物）： 放置于最难灭菌的包裹或容器内部。其设计用于在暴露于特定灭菌参数（如特定温度维持特定时间）时发生反应并达标（如临界点到达指定区域）。
- 综合指示物： 设计用于对所有关键灭菌参数（时间、温度、饱和蒸汽）综合响应，其变化终点更接近达到无菌所需的条件。但其可靠性低于生物指示物。
- 作用： 即时、直观地提供灭菌循环是否正常运行、关键参数是否达到的初步信息。是生物监测的重要辅助工具和日常监控手段。
-
生物指示物 (BI) 检测：
- 原理： 使用对灭菌工艺具有高度抗性的标准化微生物孢子（最常用于蒸汽灭菌的是嗜热脂肪地芽孢杆菌 (Geobacillus stearothermophilus) ATCC 7953 或 12980），其D值（在设定温度下杀灭90%微生物所需时间）已知且稳定。灭菌后通过培养检测孢子是否被杀灭，直接验证灭菌过程是否能达到无菌保证水平（SAL ≤ 10⁻⁶）。
- 方法：
- 将生物指示物（含特定数量活孢子，如10⁵至10⁶）放置于标准测试包或产品灭菌验证包（PCD）内部最难灭菌位置。
- 随同实际负载或模拟负载运行完整灭菌程序。
- 程序结束后，在严格无菌条件下取出生物指示物。
- 按照说明书要求进行培养（通常专用培养液，56-60℃培养24-48或7天）。
- 同时培养一个未灭菌的同批次生物指示物作为阳性对照。
- 结果判读：
- 测试组培养阴性（无生长） + 阳性对照组培养阳性（有生长）： 灭菌过程通过。
- 测试组培养阳性（有生长）： 灭菌过程失败。阳性结果意味着灭菌过程未达到预期无菌保证水平，必须被视为严重事件，立即停用灭菌器，召回本次循环处理的相关物品，并彻底调查原因（设备故障、装载问题、程序错误等）。
- 重要性： 生物监测是验证灭菌效果最可靠、最直接、国际公认的“金标准”。
三、 检测周期与实施规范
- 常规监测：
- 物理监测（仪表观察）： 每次灭菌循环进行，记录关键参数（温度、压力、时间）。
- 化学监测： 每次灭菌循环进行，每包外使用过程指示物，包内（尤其是植入物、难以穿透的器械包）使用包内化学指示物或综合指示物。
- B-D测试： 预真空/脉动真空灭菌器每日首次灭菌前或空载情况下连续灭菌时必须进行；设备维修后也必须进行。
- 生物监测：
- 常规监测： 至少每周进行一次（使用常规灭菌程序）。
- 植入物： 每批次 必须进行生物监测，结果阴性后方可放行（紧急情况下可结合物理化学监控提前放行，但生物监测结果阴性后方可追溯性记录）。
- 紧急情况替代方案（EOE）： 在法规允许且满足严格条件下，可使用具备特定性能的综合指示物（如Class 5）结合增强的物理化学监测作为日常替代，但必须定期（至少每月）进行生物监测验证。
- 首次使用、移位后及大修后： 必须进行全面的性能鉴定（IQ/OQ/PQ），包括满载热分布、热穿透测试及生物挑战测试（使用生物指示物），确保设备在特定安装位置或维修后性能达标。
- 检测记录： 所有检测结果（物理参数、化学指示物照片或记录、生物监测培养结果）必须清晰、完整、可追溯地记录并存档备查。记录应包括检测日期、灭菌器编号、程序名称、检测物类型/位置、结果、操作及复核人员签名等。
四、 关键注意事项
- 严格遵循规范： 所有检测必须依据最新有效的国家/行业标准和设备制造商的操作规程执行。
- 专业资质： 检测人员需接受专业培训，掌握灭菌原理、设备操作、检测方法及结果判读标准。
- 合格耗材： 使用的化学指示物、生物指示物、测试包必须来源可靠，具有有效的注册备案证明或符合相关国际国内标准（如ISO 11140, ISO 11138），并在有效期内正确储存和使用。
- 综合应用： 物理、化学、生物监测三者相辅相成，缺一不可。不能仅依赖任何一种单一方法。
- 阳性结果的严肃性： 生物监测阳性结果是灭菌失败的明确信号，必须启动严格的不合格品处理流程和根本原因调查程序。
- 设备维护： 定期进行预防性维护保养（如清洁、密封圈检查更换、真空泵维护等）是确保灭菌器持续有效运行的基础。
结论
系统、规范的检测是确保压力蒸汽灭菌有效性和安全性的基石。通过严格执行物理参数监控、B-D测试（适用时）、化学指示物即时监测，并最终依靠生物指示物对灭菌效果进行金标准验证，结合明确的检测周期、详实的记录管理和设备维护，才能最大限度地消除灭菌失败风险，切实保障灭菌物品的无菌质量，为安全提供可靠保障。任何检测环节的疏忽都可能导致严重后果，必须予以最高程度的重视。