酚红球菌（Phenol Red Broth，简称PRB）是一种在微生物学实验室中广泛用于检测特定细菌代谢特性的培养基系统，尤其在鉴定肠道菌群时具有重要意义。虽然“酚红球菌”这一名称并非指某种具体的细菌，而是指以酚红作为pH指示剂的生化检测体系，但其在病原菌筛查、临床诊断以及环境微生物监测中发挥着关键作用。该检测方法主要通过观察细菌在含有特定糖类的酚红肉汤中生长后引起的颜色变化，判断其发酵糖类产酸或产气的能力。由于不同微生物对糖类的代谢路径存在差异，因此酚红球菌检测成为区分如大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等革兰氏阴性杆菌的重要手段之一。现代临床微生物实验室中，该检测常作为初步生化鉴定流程的一部分，配合其他试验共同完成病原体的确认。
检测项目
酚红球菌检测主要用于评估微生物对特定碳源的利用能力，常见的检测项目包括葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖和甘露醇等糖类的发酵反应。每个检测项目使用含有相应糖类的酚红肉汤培养基，接种待测菌株后，通过观察培养过程中培养基颜色的变化及气体产生情况，判断细菌的代谢特性。例如，大肠杆菌能发酵乳糖产酸产气，使培养基由红色变为黄色并产生气泡；而沙门氏菌通常不发酵乳糖，因此培养基颜色保持不变。这些反应有助于快速区分不同种类的肠道致病菌，为后续的鉴定提供依据。
检测仪器
进行酚红球菌检测所需的仪器设备相对简单，主要包括恒温培养箱、无菌接种环或移液器、试管架、高压灭菌锅以及生物安全柜等。恒温培养箱用于提供稳定的培养环境（通常为35–37℃），确保细菌正常生长；高压灭菌锅用于对培养基和实验器具进行灭菌处理，防止污染；生物安全柜则保障操作过程中的生物安全，特别是在处理潜在致病菌时至关重要。此外，部分实验室可能配备自动微生物鉴定系统（如VITEK、API系统），这些系统集成了酚红肉汤微孔板，可实现高通量、自动化的检测与结果分析。
检测方法
酚红球菌检测的标准操作流程如下：首先，制备含有特定糖类和0.0012%酚红指示剂的肉汤培养基，并分装至小试管中，每管配装倒置的杜氏小管以收集气体。随后，在无菌条件下接种纯培养的待测菌株，通常使用4–6小时新鲜培养的菌液，接种量约为1–2环。接种后的试管置于35–37℃恒温培养箱中培养18–24小时，部分缓慢反应菌株可延长至48小时。观察指标主要包括培养基颜色变化（红色→黄色表示产酸，红色加深或变为粉红色可能表示产碱）以及杜氏小管内是否有气泡生成（表示产气）。结果记录需结合产酸、产气情况综合判断。
检测标准
酚红球菌检测的标准依据《临床微生物学检验标准操作程序》（CLSI M07和M02文件）以及《食品安全国家标准 食品微生物学检验》（GB 4789系列）等相关规范执行。检测过程中需设置阳性对照（如大肠杆菌ATCC 25922）和阴性对照（如无菌接种的培养基），以确保试剂有效性和操作准确性。结果判读应严格按照标准进行：产酸表现为培养基由红变黄，产气则在杜氏小管中可见气泡；若未发生颜色变化或仅轻微变化，则判定为阴性反应。所有检测应在生物安全二级（BSL-2）条件下进行，操作人员需佩戴个人防护装备，废弃物需经高压灭菌处理。检测结果应与其他生化试验（如IMViC试验、氧化酶试验等）结合，以提高鉴定的准确性和可靠性。
