小核菌，学名 Sclerotium rolfsii，又称草乌白绢病菌，是一种广泛分布于热带和亚热带地区的土传性植物病原真菌，能够侵染包括草乌在内的多种药用植物、蔬菜及经济作物，引发严重的白绢病。该病害特征表现为植株根部或茎基部出现白色绢丝状菌丝体，后期形成褐色至黑褐色的小菌核，导致植株萎蔫、枯死，严重影响产量和品质。由于其菌核可在土壤中长期存活，传播途径多样，防治难度大，因此对小核菌的早期检测与精准鉴定显得尤为重要。科学、系统的检测手段不仅能有效监控病害发生动态，还能为农业管理、种苗检疫和病害防控提供可靠依据。目前，针对小核菌的检测已形成涵盖形态学观察、分子生物学技术、免疫学方法及现代仪器分析在内的多维度技术体系。
检测项目
小核菌检测主要涵盖以下几个关键项目：一是病原菌的形态学鉴定，包括菌丝形态、菌核形状与颜色等；二是病原物的分离与纯化，用于后续分析；三是分子生物学检测，如ITS序列分析、特异性PCR扩增等；四是免疫学检测，利用抗原-抗体反应进行快速筛查；五是土壤或植株样本中病原菌的定性和定量检测；六是菌核存活能力与萌发率测定，评估其侵染潜力。这些检测项目相互补充，可全面评估小核菌的存在状态与潜在危害。
检测仪器
在小核菌检测过程中，需借助多种专业仪器设备以确保检测的准确性与效率。常用的检测仪器包括：生物显微镜和体视显微镜，用于观察菌丝和菌核的形态特征；PCR仪（聚合酶链式反应仪），用于扩增特异性DNA片段；电泳系统（如琼脂糖凝胶电泳装置），用于分离和鉴定PCR产物；凝胶成像系统，用于拍照并分析电泳结果；高速离心机，用于DNA提取过程中的样品处理；超净工作台和恒温培养箱，用于病原菌的分离与纯化培养；实时荧光定量PCR仪（qPCR），用于实现病原菌的精准定量检测；此外，酶标仪可用于ELISA等免疫学检测方法中。
检测方法
小核菌的检测方法主要包括传统方法和现代分子技术两大类。传统方法以组织分离法为主：取病株根茎部病变组织，经表面消毒后置于PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基上培养，在25–30℃条件下观察菌落形态，白色放射状菌丝及后期形成的圆形褐色小菌核为典型特征。现代检测方法则以分子生物学手段为核心，常用的是基于核糖体DNA内转录间隔区（ITS）的PCR扩增技术，通过设计特异性引物（如ITS1/ITS4）进行扩增并测序比对，实现精准鉴定。此外，实时荧光定量PCR（qPCR）可对土壤或植物样本中的小核菌DNA进行定量分析，灵敏度高、特异性强。免疫学方法如酶联免疫吸附 assay（ELISA）也可用于大批量样本的快速筛查，尤其适用于田间监测。
检测标准
小核菌的检测需遵循一定的技术规范与标准，以确保结果的科学性和可比性。目前，我国尚未颁布专门针对小核菌的国家标准，但在《植物检疫实验室检测技术规范》（SN/T 标准系列）及《药用植物病害诊断技术规程》等行业标准中，对土传病原真菌的检测流程、培养条件、分子检测引物设计和结果判读等方面提供了参考依据。国际上，国际植物保护公约（IPPC）和欧洲与地中海植物保护组织（EPPO）发布的检测指南也推荐使用形态学结合分子生物学的方法进行小核菌鉴定。检测结果的判定通常依据：菌落形态符合特征、PCR扩增出预期大小的特异性条带、测序结果与GenBank中 Sclerotium rolfsii 的序列同源性高于98%，或qPCR Ct值在有效范围内。所有操作应符合实验室生物安全规范，避免交叉污染。
