布氏白僵菌（Beauveria brongniartii），又称卵孢白僵菌，是一种广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌，属于丝孢纲、丛梗孢目、白僵菌属。其通过侵染多种害虫（如蛴螬、金龟子等地下害虫）并在虫体内大量繁殖，最终导致害虫死亡，是绿色农业和生态农业中重要的生物杀虫剂之一。随着其在农林害虫综合防治中的应用日益广泛，对布氏白僵菌的准确检测与鉴定显得尤为重要。准确的检测不仅有助于评估制剂中活菌含量与纯度，还能防止杂菌污染、确保产品质量，同时在生态环境监测和病原流行病学研究中具有重要意义。因此，建立科学、灵敏、可靠的布氏白僵菌检测体系，涵盖检测项目、检测仪器、检测方法及检测标准，已成为生物农药质量控制和科研实践中的关键环节。
检测项目
布氏白僵菌的检测主要包括以下几个核心项目：活菌数测定、菌种纯度鉴定、形态学特征分析、分子生物学鉴定、产孢能力评估、致病力测定以及污染物（如杂菌、重金属、农药残留）检测。其中，活菌数（CFU/g或CFU/mL）是衡量制剂效力的关键指标；菌种纯度检测用于确认是否存在其他真菌或细菌污染；分子鉴定则用于准确区分布氏白僵菌与其他相近种（如球孢白僵菌 Beauveria bassiana）；致病力测试通常通过接种目标害虫观察死亡率来评估其生物活性。
检测仪器
布氏白僵菌的检测依赖多种专业仪器设备。常用仪器包括：超净工作台（用于无菌操作）、恒温培养箱（用于菌株培养与孢子萌发实验）、光学显微镜和相差显微镜（观察菌丝形态、分生孢子结构）、扫描电子显微镜（SEM，用于高分辨率观察孢子表面纹饰）、PCR仪（用于DNA扩增）、电泳系统（用于检测PCR产物）、凝胶成像系统（分析DNA条带）、分光光度计（测定菌液浓度）、自动菌落计数器（提高CFU统计效率）以及高效液相色谱仪（HPLC，用于代谢产物或污染物分析）。此外，实时荧光定量PCR仪（qPCR）可用于高灵敏度的特异性检测和定量分析。
检测方法
布氏白僵菌的检测方法涵盖传统微生物学方法与现代分子生物学技术。传统方法包括：平板稀释涂布法测定活菌数，PDA培养基培养观察菌落形态（通常为白色絮状、后期产孢呈灰绿色），显微镜下观察分生孢子梗的轮生结构及卵圆形分生孢子。分子检测方法主要包括：ITS序列扩增与测序（ITS1-5.8S-ITS2区域是真菌鉴定的通用条形码），通过比对GenBank数据库确认种属；此外，可采用特异性引物进行PCR扩增，如针对布氏白僵菌设计的SCAR标记或AFLP指纹图谱分析。实时荧光定量PCR技术还可实现环境样本中布氏白僵菌的快速定量检测。致病力检测通常采用室内生测法，将孢子悬浮液喷洒或注射至目标昆虫（如蛴螬），记录7–14天内的校正死亡率。
检测标准
布氏白僵菌的检测需遵循相关国家标准和行业规范。目前，中国《GB/T 20673-2006 生物农药中白僵菌的检测方法》规定了白僵菌制剂的活菌数测定、杂菌率、pH值、水分含量等指标。此外，《NY/T 2985-2016 微生物农药制剂产品标准编写指南》对微生物农药的质量控制提出系统要求。对于布氏白僵菌的分子鉴定，建议参照《ISO/TS 16196:2015 Soil quality — Detection and quantification of fungal biocontrol agents in soil》等国际技术规范。检测结果应满足：活菌数≥1.0×10⁸ CFU/g（或CFU/mL），杂菌率≤5%，无致病性细菌或霉菌污染，ITS序列与标准菌株（如CBS 150.85或ARSEF 2863）同源性≥99%。所有检测过程应符合实验室生物安全二级（BSL-2）管理要求，防止交叉污染与环境释放。
