乳制品及特殊膳食食品大肠菌群检测

发布时间:2026-05-18 阅读量:7 作者:生物检测中心

乳制品及特殊膳食食品作为直接关乎人体健康,特别是婴幼儿、病人等特殊群体营养与安全的重要食品类别,其微生物安全性至关重要。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指示菌之一,其存在不仅可能预示着食品在生产、加工、储存、运输等环节受到了粪便污染,也可能意味着存在肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌等)污染的风险。因此,对乳制品及特殊膳食食品进行大肠菌群检测,是保障食品安全、评估生产工艺卫生控制水平、履行法规要求以及维护消费者信心的核心环节。检测结果会受到样品采集的代表性、检测方法的准确性、实验环境的洁净度以及操作人员的规范性等多种因素的影响。系统、准确的大肠菌群检测,对于预防食源性疾病、指导企业进行卫生质量改进、为监管部门提供执法依据具有不可替代的价值。

具体的检测项目

大肠菌群的检测并非针对单一菌种,而是对一群在特定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌的统称。检测项目核心是定量测定样品中大肠菌群的数量,通常以每克(g)或每毫升(mL)样品中大肠菌群的最近似数(MPN)或菌落形成单位(CFU)来表示。对于乳制品(如液态奶、酸奶、奶粉、奶酪等)和特殊膳食食品(如婴幼儿配方食品、特殊医学用途配方食品、辅食营养补充品等),检测需覆盖从原料到成品的各个关键控制点。

完成检测所需的仪器设备

进行大肠菌群检测需要配备专业的微生物实验室设备。主要包括:用于样品制备的均质器或拍击式均质袋;用于精确量取样品和稀释液的移液器及无菌吸头;进行样品系列稀释所需的无菌稀释瓶或试管;用于培养基制备和灭菌的高压蒸汽灭菌器;用于培养微生物的恒温培养箱(通常需设定在36±1°C);用于菌落计数和观察的菌落计数器或放大镜;确保无菌操作环境的生物安全柜或超净工作台;以及实验所需的玻璃器皿(如平皿、试管)和培养基(如月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤或结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)等)。

执行检测所运用的方法

目前国内外普遍采用的标准方法主要包括MPN法和平板计数法。MPN法是一种基于概率统计的间接计数方法,适用于检测大肠菌群含量较低的样品或带有颗粒、不易分散的样品。其基本流程为:将样品制成系列稀释度,分别接种于LST肉汤发酵管中,经36±1°C培养24-48小时,观察产气情况;将产气管的培养物转种至BGLB肉汤中进行确认,再次培养观察产气,最后根据确认产气的管数查MPN表得出结果。平板计数法则更为直接,适用于菌落数较高的样品。流程为:将样品稀释液与融化的VRBA培养基混合倾注平板,或涂布于VRBA平板表面,待凝固后再覆盖一层VRBA琼脂(以防菌落蔓延),经36±1°C培养18-24小时后,计数典型或可疑的大肠菌群菌落(通常为紫红色,周围有红色胆盐沉淀环),并挑取部分典型菌落进行确证试验(如接种BGLB肉汤)。

进行检测工作所需遵循的标准

为确保检测结果的准确性、可比性和法律效力,检测工作必须严格遵循国家或国际权威机构发布的标准方法。在中国,强制性遵循的标准是GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》。该标准详细规定了MPN法和平板计数法的具体操作步骤、培养基配方、结果报告方式等。此外,行业或企业也可参考国际标准化组织(ISO)的标准,如ISO 4832:2006(微生物学-大肠菌群计数的水平方法-菌落计数技术)。对于特殊膳食食品,尤其是婴幼儿配方食品,还需满足其产品标准(如GB 10765-2021等)中对大肠菌群的限量规定,检测方法是执行GB 4789.3的基础。