志贺氏菌（Shigella）是一类重要的食源性致病菌，主要引起细菌性痢疾，临床表现为发热、腹痛、腹泻、里急后重及黏液脓血便等症状，严重时可导致脱水、败血症甚至死亡。由于其传播途径广泛，常通过污染的水源、食物或人与人密切接触传播，因此在食品安全、公共卫生和临床检验中，志贺氏菌的检测具有重要意义。为确保检测结果的准确性与可靠性，实验室通常会使用标准质控菌株进行检测流程的质量控制。志贺氏菌（质控菌）检测不仅用于验证检测方法的灵敏度与特异性，还用于评估实验人员操作的规范性、培养基性能及仪器设备的稳定性。因此，建立科学、规范的检测流程，明确检测项目、仪器设备、检测方法及执行标准，是保障微生物检测质量的关键环节。
检测项目
志贺氏菌（质控菌）检测的主要项目包括：菌株的形态学观察、生化特性鉴定、血清学分型、分子生物学检测以及药敏试验等。在质控检测中，重点验证检测系统的识别能力，确保实验室能够正确分离和鉴定志贺氏菌。具体项目包括：
- 革兰氏染色特性（阴性短杆菌）
- 动力试验（无动力）
- 生化反应：如葡萄糖发酵产酸不产气、乳糖不发酵、靛基质试验阴性、尿素酶阴性、赖氨酸脱羧酶阴性等
- 血清凝集试验：用于确定血清型（如痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内氏志贺菌）
- PCR检测：针对侵袭性质粒抗原H（ipaH）、ial等特异性基因进行扩增
- 抗生素敏感性试验：评估对常用抗菌药物（如氨苄西林、复方新诺明、头孢类、喹诺酮类）的敏感性
检测仪器
志贺氏菌质控检测过程中，需使用一系列标准化的实验室仪器设备，以确保检测结果的可重复性和准确性。主要仪器包括：
- 生物安全柜：用于无菌操作，防止交叉污染和操作人员暴露
- 恒温培养箱：提供35–37℃恒温环境，用于细菌增殖与培养
- 显微镜：用于观察革兰染色后的菌体形态
- 全自动微生物生化鉴定系统（如VITEK 2、API 20E）：快速进行生化鉴定
- PCR仪：用于扩增志贺氏菌特异性基因片段
- 电泳系统：用于PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析
- 酶标仪：可用于ELISA法检测志贺氏菌抗原
- 药敏检测系统：如微量稀释法或纸片扩散法（K-B法）配套设备
检测方法
志贺氏菌质控菌的检测遵循标准的微生物学检测流程，通常包括增菌、分离培养、初步鉴定、确证试验和分子验证等步骤：
- 增菌培养：将质控菌株接种于营养肉汤或GN增菌液中，37℃培养6–8小时，促进菌体恢复与增殖。
- 分离培养：接种至选择性培养基如SS琼脂、麦康凯琼脂或HE琼脂，37℃培养18–24小时，观察无色半透明、不发酵乳糖的可疑菌落。
- 纯培养与染色：挑取典型菌落进行革兰染色，确认为革兰阴性无芽孢杆菌。
- 生化鉴定：通过系列生化试验或自动鉴定系统进行鉴定，确认典型生化特征。
- 血清学鉴定：使用志贺氏菌O群多价和单价抗血清进行玻片凝集试验，确定血清型。
- 分子生物学检测：采用PCR方法扩增ipaH等特异性基因，确认为志贺氏菌或志贺样大肠杆菌（Enteroinvasive E. coli, EIEC）。
- 药敏试验：采用CLSI推荐的纸片扩散法或MIC法，评估抗菌药物敏感性。
检测标准
志贺氏菌检测需依据国家和国际公认的技术标准执行，确保检测过程的标准化与结果的可比性。主要参考标准包括：
- GB 4789.5-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 志贺氏菌检验》：中国食品安全检验的权威标准，规定了食品中志贺氏菌的检测流程与判定依据。
- ISO 21567:2019《Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection of Shigella spp.》：国际标准化组织发布的志贺氏菌检测水平方法。
- CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）标准：用于药敏试验的执行与结果判读，如M100文件。
- WHO和CDC技术指南：提供志贺氏菌检测、分型及耐药监测的技术支持。
在质控菌检测中，实验室应确保所用标准菌株来源于权威菌种保藏中心（如CMCC、ATCC），如ATCC 12022（福氏志贺菌）或CMCC(B) 51572（宋内氏志贺菌），并定期进行传代、保存与活性验证，以保证检测系统的有效性。
综上所述，志贺氏菌（质控菌）检测是一项系统性、规范化的质量控制工作，涵盖多个检测项目，依赖先进的检测仪器，遵循科学的检测方法，并严格执行国家与国际检测标准。通过全面的质控检测，可有效保障实验室在志贺氏菌检测中的准确性、可靠性与可追溯性，为食品安全与公共卫生提供坚实的技术支撑。
