纸和纸板材料及其制品，尤其是那些可能直接或间接接触食品、人体黏膜或用于医疗、卫生领域的制品，其微生物安全性至关重要。大肠菌群作为一类重要的卫生指示菌，其检测是评估产品卫生质量、生产过程控制有效性和潜在粪便污染风险的关键环节。大肠菌群的存在可能预示着产品在生产、加工、储存或运输过程中受到了污染，存在致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌等）污染的风险，因此对其进行严格检测是保障公共健康和市场合规性的必要步骤。
检测项目
本检测的核心项目为大肠菌群。大肠菌群并非细菌学分类命名，而是指一群在特定培养条件下，能发酵乳糖、产酸产气的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。该指标主要用于判断样品是否受到人或温血动物粪便的污染，以及污染的程度。对于纸和纸板材料及其制品，通常检测的是其表面或内部可迁移出的大肠菌群数量，单位常以CFU/g（克）或CFU/100cm²（每100平方厘米）表示。
检测仪器
进行大肠菌群检测通常需要以下主要仪器设备：无菌均质器或拍击式均质袋（用于样品前处理与微生物的充分释放）、电子天平（精确称量样品）、恒温培养箱（提供大肠菌群生长的恒定温度，通常为36±1℃）、生物安全柜或超净工作台（提供无菌操作环境，防止污染）、高压蒸汽灭菌器（对培养基、稀释液及实验器具进行灭菌）、菌落计数器（或自动菌落计数仪，用于计数菌落形成单位）、移液器（精确移取液体样品及稀释液）以及必要的玻璃器皿（如培养皿、试管、三角瓶等）。
检测方法
纸和纸板材料及其制品大肠菌群的检测方法主要分为经典培养法和快速检测法。经典培养法是国内外标准普遍采用的方法，其主流步骤为：
1. 样品处理：在无菌条件下，称取一定量（如25g）剪碎的样品，加入到含有适量无菌生理盐水或缓冲蛋白胨水的均质袋中，充分均质制成1:10的样品匀液。
2. 增菌与筛选：将样品匀液或系列稀释液接种至月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤中，于36±1℃培养24-48小时。观察小倒管内是否有气泡产生（产气）。
3. 确证实验：将所有产气的LST管，用接种环划线接种或取培养物接种到煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤中，再次于36±1℃培养24-48小时。BGLB肉汤中产气者，即可确证为大肠菌群阳性。
4. 结果计算：根据确证为阳性的试管数量，通过查对MPN（最可能数）表，计算出样品中大肠菌群的MPN值。此外，也可采用结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）进行平板计数，典型菌落为紫红色，周围有红色胆盐沉淀环。
检测标准
纸和纸板材料及其制品大肠菌群的检测需遵循相关的国家、行业或国际标准，以确保检测结果的准确性、可比性和法律效力。常用的标准包括：
- 中国国家标准（GB）：GB 4789.3-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》。虽然此标准主要针对食品，但其方法原理和操作流程常被借鉴用于相关产品的检测。针对纸制品，可参考GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》中的微生物检测方法。
- 国际标准（ISO）：ISO 16649系列标准（特别是ISO 16649-2）规定了食品和饲料中β-葡萄糖醛酸酶阳性大肠杆菌的计数方法，原理相关。
- 其他标准：美国药典（USP）、美国材料与试验协会（ASTM）以及欧盟的相关指令中，也可能包含对接触性材料微生物限量的要求及检测方法指南。
企业在进行检测时，应首先明确产品目标市场及法规要求，选择并严格执行对应的标准方法。
