烟曲霉毒素B（Aflatoxin B）是一类由黄曲霉（Aspergillus flavus）和寄生曲霉（Aspergillus parasiticus）等真菌产生的次级代谢产物，属于剧毒的真菌毒素。其中，黄曲霉毒素B1（AFB1）是毒性最强、致癌性最高的天然化合物之一，被世界卫生组织（WHO）下属的国际癌症研究机构（IARC）列为一类致癌物。这类毒素广泛存在于被真菌污染的农产品中，如玉米、花生、大米、小麦、坚果以及动物饲料等。由于其具有严重的肝毒性、致突变性、致畸性和致癌性，对人类和动物健康构成巨大威胁。因此，对食品和饲料中的烟曲霉毒素B进行准确、快速、灵敏的检测，是保障食品安全、维护公共卫生的关键环节。高效的检测技术能够及时发现并控制污染源，有效降低暴露风险，对于农产品贸易、质量控制和消费者信心都具有不可估量的价值。
检测项目
烟曲霉毒素B的检测主要针对以下几种常见且危害性较大的组分：
- 黄曲霉毒素B1 (AFB1)：毒性最强，是主要检测目标。
- 黄曲霉毒素B2 (AFB2)：由AFB1代谢而来，毒性次之。
- 黄曲霉毒素G1 (AFG1) 和 黄曲霉毒素G2 (AFG2)：虽然名称中不含“B”，但因与B族毒素共存且结构相似，在综合检测中常一同考量，尤其在某些曲霉菌株中产生。
- 黄曲霉毒素M1 (AFM1) 和 黄曲霉毒素M2 (AFM2)：AFB1和AFB2在动物体内代谢产生的羟基化产物，常在牛奶及乳制品中被检测。
在实际应用中，根据检测目的和样品类型，可能会选择性地检测其中一种或多种组分。
检测仪器
烟曲霉毒素B的检测需要依赖一系列精密、高效的分析仪器。常用的检测仪器包括：
- 高效液相色谱仪 (HPLC)：配备荧光检测器 (FLD) 或紫外检测器 (UV) 是最常用的定量分析仪器。通过柱后衍生化技术（如溴化或碘化），可以显著增强AFB1和AFB2的荧光信号，提高检测灵敏度。
- 液相色谱-串联质谱仪 (LC-MS/MS)：提供更高的灵敏度、选择性和定性能力，适用于复杂基质中多种真菌毒素的同时检测，是目前公认的痕量真菌毒素检测的“金标准”。
- 酶联免疫吸附检测仪 (ELISA Reader)：用于ELISA方法的吸光度测定，实现高通量、快速的初筛。
- 荧光免疫层析分析仪 (FIA Reader)：用于读取快速检测卡（胶体金免疫层析法）的结果，实现半定量或定量检测。
- 气相色谱-质谱联用仪 (GC-MS)：在特定情况下也可用于某些衍生化后的真菌毒素分析，但相对LC-MS/MS，在极性真菌毒素检测上应用较少。
- 薄层色谱仪 (TLC)：早期常用的半定量分析方法，依赖于紫外灯下荧光斑点的观察和比较。
检测方法
烟曲霉毒素B的检测方法种类繁多，可分为筛选方法和确证方法两大类：
1. 筛选方法
酶联免疫吸附法 (ELISA)：基于抗原抗体特异性反应，具有高通量、快速、灵敏的特点，适合大量样品的初步筛查。操作简便，成本相对较低。
胶体金免疫层析法（快速检测试纸条/卡）：一种快速定性或半定量检测方法，操作简单，无需特殊设备，适用于现场快速检测和初步筛查。
荧光免疫层析法 (FIA)：结合荧光标记技术，提高检测灵敏度，可实现半定量或定量分析。
薄层色谱法 (TLC)：传统且成本较低的方法，通过样品提取、净化、点样、展开和紫外灯下观察荧光斑点来定性或半定量检测。适用于基础实验室。
2. 确证方法
高效液相色谱法 (HPLC)：
是目前应用最广泛的定量检测方法之一。通常采用免疫亲和柱（IAC）进行样品净化，然后通过HPLC分离，配合荧光检测器（FLD）。对于AFB1和AFB2，常需要进行柱后衍生化（如溴化法、碘化法），以增强荧光信号，提高灵敏度。
液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS)：
被认为真菌毒素检测的“金标准”。该方法结合了液相色谱的高效分离能力和串联质谱的高灵敏度、高选择性、高特异性。通过多反应监测（MRM）模式，可以同时检测并准确定量多种黄曲霉毒素及其代谢产物，且无需衍生化，抗基质干扰能力强，适用于复杂样品基质的精确检测。
检测标准
烟曲霉毒素B的检测和限量标准在国际和国内都有严格规定，以确保食品和饲料安全。以下是一些重要的参考标准：
国际食品法典委员会 (CAC)：制定了各类食品中黄曲霉毒素的限量标准，为国际贸易提供参考依据。
欧盟 (EU)：拥有全球最严格的黄曲霉毒素限量标准之一，涉及谷物、坚果、干果、香料、乳制品等多种食品和饲料。
美国食品药品监督管理局 (FDA)：对食品和饲料中的黄曲霉毒素也设定了严格的限量标准，如玉米和花生中AFB1的限量。
中国国家标准 (GB)：
- GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》：规定了谷物及其制品、花生及其制品、坚果、乳制品等各类食品中黄曲霉毒素B1的限量。
- GB/T 5009.22-2016《食品中黄曲霉毒素B族和M族测定》：规定了测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1、M2的方法，如免疫亲和层析净化-高效液相色谱法和免疫亲和层析净化-液相色谱-串联质谱法等。
- GB/T 18979-2003《饲料中黄曲霉毒素B1的测定》：规定了饲料中黄曲霉毒素B1的检测方法和限量。
- GB/T 30955-2014《食品中黄曲霉毒素B1的快速检测 胶体金免疫层析法》：提供了快速筛查的方法标准。
这些标准确保了检测结果的准确性和可比性，为食品安全监管提供了科学依据。
