赭曲霉毒素（Ochratoxins）是一类由某些曲霉属（Aspergillus）和青霉属（Penicillium）真菌产生的次生代谢产物，其中赭曲霉毒素A（OTA）是研究最多且毒性最强的一种，而赭曲霉毒素B（OTB）与OTA结构相似，但通常认为毒性相对较低，但在食品和饲料安全领域依然是一个重要的关注点。这些毒素广泛存在于谷物、咖啡豆、可可豆、葡萄酒、啤酒以及动物产品中，对人类和动物健康构成潜在威胁，可能引起肾脏损害、免疫抑制和致癌作用。因此，对赭曲霉毒素B进行准确、灵敏的检测对于保障食品和饲料安全至关重要。本次文章将详细探讨赭曲霉毒素B的检测项目范围、所使用的主要仪器、常见的检测方法及其特点，以及相关的检测标准。
检测项目范围
赭曲霉毒素B的检测广泛应用于多种基质中，主要包括：
- 食品及食品原料：特别是谷物（如玉米、小麦、大麦、燕麦）、油料制品、烘焙产品、咖啡、可可等易受菌污染的农产品。
- 饲料产品：动物饲料是霉菌毒素污染的常见载体，对畜牧业健康和动物产品安全有直接影响。
- 农产品：包括部分水果、蔬菜及其加工品。
- 酒类产品：如葡萄酒和啤酒，因其生产过程中涉及发酵，也可能存在赭曲霉毒素B的污染。
- 中药材及其制品：部分中药材在储存和加工过程中也可能被产毒真菌污染。
主要检测仪器
当前对赭曲霉毒素B的检测主要依赖于高灵敏度和高选择性的分析仪器，以确保结果的准确性。
液相色谱-质谱联用技术
液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）是目前公认的检测真菌毒素的“金标准”，具有极高的灵敏度和特异性，能够同时对多种真菌毒素进行定性和定量分析。
- LC-MS/MS（液相色谱-串联质谱）：通过液相色谱将混合物分离，再通过串联质谱进行碎裂和检测，实现目标物的精准识别和定量。
- UPLC-MS/MS（超高效液相色谱-串联质谱）：在LC-MS/MS的基础上，采用更小粒径的色谱填料，能显著缩短分析时间，提高分离效率和灵敏度。
- HPLC-MS/MS（高效液相色谱-串联质谱）：与UPLC相比，HPLC在分离效率上略逊一筹，但依然是检测赭曲霉毒素B的常用且有效的方法。
高效液相色谱法
高效液相色谱（HPLC）是另一种常用的检测技术，尤其当与荧光检测器（FLD）联用时，对具有荧光特性的赭曲霉毒素B（以及OTA）具有良好的灵敏度。
- HPLC-FLD（高效液相色谱-荧光检测）：该方法利用赭曲霉毒素B的天然荧光特性进行检测，操作相对简单，成本较低。
- HPLC配光化学衍生化检测器：对于荧光信号较弱或不具备荧光特性的物质，可以通过光化学衍生化将其转化为具有荧光信号的衍生物再进行检测，提高检测灵敏度。
检测方法
不同的检测方法各有特点，实验室会根据样品类型、检测需求、成本预算等因素选择合适的方法。
LC-MS/MS方法优势
LC-MS/MS方法在检测赭曲霉毒素B时具有显著优势：
- 高灵敏度和选择性：能够检测到极低浓度的赭曲霉毒素B，且受样品基质干扰小。
- 可同时检测多种真菌毒素：在一次分析中即可完成对多种相关霉菌毒素的筛查和定量，效率高。
- 法定性准确：质谱碎片信息为定性提供了可靠的证据。
- 检测范围广：适用于多种复杂基质样品。
然而，LC-MS/MS的设备成本和运行维护成本较高，对操作人员的技术要求也较高。
HPLC方法特点
HPLC方法，尤其是结合荧光检测的方法，也是赭曲霉毒素B检测的重要手段：
- 操作相对简单：相较于质谱，HPLC的操作和维护更为简便。
- 灵敏度高：对于具有荧光特性的赭曲霉毒素B，荧光检测器能提供良好的灵敏度。
- 稳定性好：方法成熟，稳定性强。
但HPLC方法的异性可能略低于质谱方法，且对于复杂基质的样品，可能需要更彻底的样品前处理以减少基质干扰。
检测标准
尽管现有国家标准主要针对赭曲霉毒素A（OTA）进行规定，但其检测原理、方法和仪器的选择对于赭曲霉毒素B的检测也具有重要的参考价值和适用性。
国家标准
- GB 5009.96-2016：
《食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素A的测定》。该标准详细规定了食品中赭曲霉毒素A的测定方法，包括高效液相色谱法（HPLC）和液相色谱-质谱法（LC-MS/MS），其样品前处理和色谱分离原理可类推应用于赭曲霉毒素B的检测。
- GB 2761-2017：
《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》。虽然此标准主要规定了黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、展青霉素、赭曲霉毒素A及玉米赤霉烯酮的限量指标，但其作为真菌毒素限量的总体框架，强调了食品中真菌毒素控制的重要性。
饲料标准
国家标准计划中包含《饲料中赭曲霉毒素A的测定》，由全国饲料工业标准化技术委员会（TC76）归口。这表明饲料中霉菌毒素的检测和控制也日益受到重视，相关方法同样适用于赭曲霉毒素B的检测。
标准物质
在进行赭曲霉毒素B的检测时，必须使用经过认证的、具有溯源性的标准物质，以确保检测结果的准确性和可靠性。这包括：
- 赭曲霉毒素B (OTB) 标准品
- 赭曲霉毒素B (OTB) 标准液
- 其他相关真菌毒素的标准品或标准溶液，用于方法验证和多组分分析。
总而言之，赭曲霉毒素B的检测是一个涉及多学科、多技术的综合性领域。目前，以LC-MS/MS和HPLC为核心的分析方法已成熟应用于各种基质样品的检测中，并且在回收率和精密度方面表现出良好的性能，确保了检测结果的准确性和可靠性。随着食品安全要求的不断提高和分析技术的发展，赭曲霉毒素B的检测方法将进一步优化，为公众健康提供更坚实的保障。
