不对称二甲基精氨酸（Asymmetric Dimethylarginine, ADMA）是一种内源性氨基酸，主要通过蛋白质的翻译后修饰生成，并在体内被蛋白精氨酸甲基转移酶（PRMTs）甲基化。它作为内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的竞争性抑制剂，能够阻碍一氧化氮（NO）的生物合成。由于NO在血管舒张、抗血小板聚集、抑制平滑肌细胞增殖以及维持血管内皮功能等方面发挥着关键作用，因此ADMA水平的升高被广泛认为是内皮功能障碍的一个重要生物标志物，与心血管疾病、慢性肾病、糖尿病、高血压等多种疾病的发生发展密切相关。鉴于其在临床上的潜在诊断和预后价值，对ADMA进行准确、灵敏的检测变得尤为重要。通过精确测定ADMA的浓度，可以帮助临床医生评估患者的血管健康状况，预测疾病风险，并指导治疗策略的制定，从而改善患者的预后。因此，不对称二甲基精氨酸的检测技术和方法的不断完善具有重要的临床意义和研究价值。
检测项目
不对称二甲基精氨酸的检测主要关注其在生物样本（如血浆血清、尿液、组织匀浆等）中的绝对浓度。在某些研究中，也可能同时检测对称二甲基精氨酸（SDMA）和L-精氨酸的水平，并计算ADMA/L-精氨酸比值，因为这个比值能更好地反映内皮型一氧化氮合酶的抑制程度。此外，结合其他心血管风险因子进行综合评估，是临床检测的常见应用。
检测仪器
ADMA的检测需要高灵敏度和特异性的分析仪器。常用的检测仪器包括：
高效液相色谱仪（HPLC）：通常结合荧光检测器（FLD）或紫外检测器（UVD），需要对ADMA进行衍生化处理以增加检测信号。HPLC设备具有成本效益和相对较好的分离能力。
液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）：这是目前公认的检测ADMA的金标准方法。LC-MS/MS具有极高的灵敏度、特异性和准确性，能够同时检测多种精氨酸代谢物，且无需复杂的衍生化步骤，大大简化了样品前处理。常见的LC-MS/MS系统包括三重四极杆质谱仪。
酶联免疫吸附测定仪（ELISA）：用于ELISA试剂盒的检测，操作简便，适用于大样本量的初步筛查，但其特异性和准确性通常低于色谱-质谱法。
毛细管电泳（CE）：在某些研究中也被用于ADMA的分析，但应用不如HPLC和LC-MS/MS广泛。
检测方法
不对称二甲基精氨酸的检测方法主要有以下几种：
高效液相色谱法（HPLC）：
原理：利用固定相和流动相对ADMA的不同亲和力，使其在色谱柱中实现分离，然后通过检测器进行定量。通常需要对ADMA进行柱前或柱后衍生化，例如与邻苯二醛（OPA）或苯基异硫氰酸酯（PITC）反应生成荧光或紫外吸收产物，以提高检测灵敏度。
优点：成本相对较低，操作相对简单。
缺点：需要衍生化步骤，耗时，可能存在基质效应干扰，特异性相对较低。
液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）：
原理：结合了液相色谱的强大分离能力和质谱的极高特异性及灵敏度。样品经过色谱分离后进入质谱仪，通过电喷雾电离（ESI）形成带电离子，然后通过串联质谱（如多反应监测，MRM模式）对ADMA及其同位素内标进行选择性检测和定量。
优点：无需衍生化，灵敏度高，特异性强，准确性好，能够同时检测多种相关代谢物，抗干扰能力强，是目前最可靠的检测方法。
缺点：仪器成本高，对操作人员要求较高。
酶联免疫吸附法（ELISA）：
原理：基于抗原抗体特异性结合的免疫学方法。通过预包被的抗体或抗原样品中的ADMA进行竞争性结合，然后通过酶标二抗和底物反应显色，最后通过酶标仪测定吸光度并计算ADMA浓度。
优点：操作简便，通量高，适用于大规模样本筛查。
缺点：批间差较大，特异性可能不如色谱-质谱法，可能存在交叉反应。
检测标准
不对称二甲基精氨酸的检测标准主要包括以下几个方面：
参考范围的建立：不同人群（如健康成人、儿童、不同疾病状态患者）的ADMA正常参考范围需通过大量健康人群样本测定后建立，并考虑年龄、性别、种族等因素。
质量控制与校准：为确保检测结果的准确性和可比性，实验室应使用经过认证的ADMA标准品进行仪器校准，并定期使用内部和外部质量控制样本进行质量评估。空白、低值、高值质控样本的运行是常规操作。
方法验证：对所采用的检测方法进行全面的验证，包括线性范围、检测限（LOD）、定量限（LOQ）、准确度、精密度（批内和批间）、回收率、基质效应、稳定性等指标，确保方法学符合要求。
样品处理和保存标准：规定血样采集、离心、血浆/血清分离、储存条件（如低温保存，避免反复冻融）等，以确保样本中ADMA的稳定性。
国际共识与指南：参照国际上关于ADMA检测和临床应用的共识和指南，例如相关学会或组织发布的技术建议，以保证检测结果的国际通用性。
