继发性甲亢模型（大鼠/小鼠）

以下是关于继发性甲亢动物模型的完整技术文章，重点阐述检测项目，内容严格避免任何企业或商业标识：

继发性甲状腺功能亢进症（甲亢）动物模型的建立与检测方案

模型类型：大鼠/小鼠 造模原理：通过外源性甲状腺激素（如 L-T4 或 T3）持续给药，抑制内源性 TSH 分泌，模拟临床因过量激素替代治疗或自主功能性甲状腺结节引发的继发性甲亢。

核心检测项目

一、血清学指标

1. 甲状腺激素谱：

   • 总 T3 (TT3) 与游离 T3 (FT3)：直接反映循环中活性甲状腺激素水平，模型组应显著升高。
   • 总 T4 (TT4) 与游离 T4 (FT4)：评估激素储备状态，持续高于正常范围提示模型成功。
   • 超敏促甲状腺激素 (sTSH)：因负反馈抑制显著降低（关键特异性指标）。

2. 下丘脑-垂体轴相关激素：

   • 促甲状腺激素释放激素 (TRH)：可检测下丘脑 TRH mRNA 表达（常下调）。
   • 垂体 TSH-β 亚基 mRNA：通过 qPCR 分析，证实 TSH 合成受抑。

二、生理代谢与器官功能指标

1. 基础代谢率：

   • 氧消耗量 (VO₂)：间接代谢笼系统监测，模型组显著增高。
   • 核心体温：红外测温仪记录，持续高于对照组。

2. 心血管系统：

   • 心率与心电图：
     • 静息心率增加 >20%
     • ECG 显示窦性心动过速，严重者可见 ST-T 改变。
   • 心脏肥大指数：
     • 心脏湿重/体重比升高
     • 超声心动图检测心室壁增厚、心输出量增加。

3. 体重与摄食行为：

   • 持续监测体重变化（典型特征：食欲亢进但体重下降）。
   • 计算食物摄入量/体重比值。

三、组织病理学检测

1. 甲状腺组织：

   • HE 染色：滤泡上皮细胞扁平化、胶质贮存增加（功能抑制状态）。
   • Ki-67 染色：细胞增殖活性降低，与 TSH 缺乏一致。

2. 垂体前叶：

   • TSH 免疫组化：促甲状腺激素细胞萎缩，染色强度减弱。
   • 细胞密度分析：TSH 阳性细胞数量减少。

3. 靶器官损伤：

   • 心肌纤维化（Masson 染色）：晚期模型可见胶原沉积。
   • 骨骼肌萎缩（HE 染色）：肌纤维直径减小。
   • 肝脂肪变性（油红 O 染色）：脂质代谢紊乱证据。

四、分子生物学检测

1. 受体与转运体表达：

   • 心脏组织：β1-肾上腺素受体 (ADRB1)、肌浆网 Ca²⁺-ATP 酶 (SERCA) mRNA 表达上调。
   • 肝脏组织：甲状腺激素受体 β (TRβ) 及葡萄糖转运体 (GLUT4) 表达变化。

2. 代谢通路基因：

   • 解耦联蛋白 (UCP1-3)、Na⁺/K⁺-ATP 酶 α 亚基等产热相关基因表达水平 (qPCR/WB)。

检测时间点设计

模型验证要点

1. 双重确认：血清学（T3/T4↑ + TSH↓）与组织学（甲状腺萎缩、垂体TSH细胞减少）结果必须一致。
2. 排除原发性甲亢：甲状腺组织无增生或结节性改变。
3. 动态监测：激素给药停止后应出现 TSH 反弹回升（证明轴反馈功能存在）。

注意事项

• 给药剂量校准：小鼠代谢速率高于大鼠，需按体表面积调整激素剂量。
• 对照设置：空白对照 + 溶剂对照（如丙二醇生理盐水）。
• 骨代谢评估：骨密度扫描（DXA）与血清 CTX-1/P1NP 检测，预防甲亢性骨质疏松。

本方案聚焦多维度检测指标，通过整合功能学、形态学及分子证据，可全面评估继发性甲亢病理进程及并发症机制，为药物干预研究提供可靠平台。