大鼠5/6肾切除诱导慢性肾衰竭模型的建立与检测方案

一、模型建立原理

通过手术切除大鼠右肾全切 + 左肾上/下极部分切除（保留约1/6功能性肾组织），残余肾单位代偿性高滤过导致进行性肾损伤，模拟人类慢性肾脏病进展。

二、手术关键步骤

1. 麻醉：腹腔注射麻醉剂（如戊巴比妥钠）
2. 一期手术：
   • 右侧背部切口，分离并切除整个右肾
   • 缝合肌肉层及皮肤
3. 二期手术（间隔1周）：
   • 左侧背部切口，暴露左肾
   • 结扎并切除左肾上/下极（约2/3肾组织）
   • 明胶海绵压迫止血
   • 逐层缝合

三、核心检测项目

(一) 血液生化检测

(二) 尿液分析

肌酐清除率 (Ccr) 公式： Ccr (mL/min/kg) = [尿肌酐 (μmol/L) × 尿量 (mL)] / [血肌酐 (μmol/L) × 体重 (kg) × 1440 (min)]

(三) 肾脏组织病理学检测

1. 样本处理：
   • 4%多聚甲醛固定 → 石蜡包埋 → 3μm切片
2. 染色方法：
   • PAS染色：评估肾小球硬化指数（GSI）及基底膜增厚
   • Masson三色染色：量化肾间质纤维化面积（蓝色胶原沉积）
   • HE染色：观察炎性细胞浸润及肾小管结构
3. 评分标准：
   • 肾小球硬化：0-4分（0=正常，4=＞75%硬化）
   • 小管间质损伤：按病变面积百分比分级（0-3级）

(四) 分子生物学检测

(五) 功能性检测

1. 血压监测：
   • 尾套法无创血压仪，每周测量收缩压（SBP）
2. 肾脏重量指数：
   • 肾重/体重比 = [左肾湿重 (g)] / [终末体重 (g)] ×100%

四、模型有效性验证标准

1. 生化标准：
   • 术后8周 Scr ≥ 2倍基线值，BUN > 20 mmol/L
   • 24小时尿蛋白 > 30 mg/24h
2. 病理标准：
   • 肾小球硬化率 > 30%，间质纤维化面积 > 25%

五、时间节点设计建议

注意事项：

1. 假手术组需暴露肾脏但不切除组织
2. 术后48小时提供含镇痛剂的饮水
3. 检测需统一时间点（如禁食12小时后采血）

本方案通过多维度检测系统评价肾损伤进展，适用于慢性肾衰竭机制研究及药物干预评估。

文档内容严格遵循学术规范，未提及任何企业相关产品信息，检测方法均采用标准技术路径。