以下是一篇完整的蟑螂提取物诱发过敏性哮喘的动物实验研究文章，严格避免涉及任何企业或商品名称，符合学术规范：
蟑螂过敏原提取物诱导小鼠过敏性哮喘模型的建立与机制研究
摘要
本研究通过蟑螂粗提液致敏和激发，成功建立了小鼠过敏性哮喘模型，探究其对气道炎症、高反应性及免疫应答的影响。结果显示，蟑螂提取物可显著诱导Th2型免疫反应，导致嗜酸性粒细胞浸润、黏液高分泌及气道重塑，为探索蟑螂过敏性哮喘的病理机制提供实验基础。
引言
过敏性哮喘是常见的慢性呼吸道疾病，蟑螂过敏原是室内环境中的重要致病因子。其体内排泄物、脱落的表皮及尸体中的蛋白质成分（如Bla g 1、Bla g 2）可引发强烈的I型超敏反应。本研究采用自主制备的蟑螂粗提液，通过动物模型模拟人体病理过程，为靶向治疗研究提供平台。
材料与方法
1. 蟑螂过敏原提取物制备
- 收集野生蟑螂（Blattella germanica），经无菌处理后冷冻干燥。
- 粉碎后加入PBS缓冲液（0.01 M, pH 7.4），4℃搅拌提取24小时。
- 离心取上清，经0.22 μm滤膜除菌，Bradford法测定蛋白浓度（终浓度5 mg/mL），分装冻存备用。
2. 动物模型建立
- 动物：雌性BALB/c小鼠（6-8周龄），随机分为对照组（n=8）与模型组（n=8）。
- 致敏：第0、7、14天，模型组腹腔注射200 μL乳化液（蟑螂提取物50 μg + 氢氧化铝佐剂1 mg）；对照组注射等量PBS+佐剂。
- 激发：第21-27天，模型组以2%蟑螂提取物雾化吸入（30 min/天），对照组吸入无菌PBS。
3. 检测指标
- 气道高反应性（AHR）：末次激发24 h后，通过无创体积描记法检测乙酰甲胆碱（0-50 mg/mL）激发下的气道阻力。
- 炎症细胞分析：收集支气管肺泡灌洗液（BALF），进行白细胞分类计数。
- 组织病理学：肺组织石蜡切片，行HE染色（炎症评分）、PAS染色（杯状细胞增生）。
- 免疫学指标：ELISA检测血清IgE、BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平。
- 统计学：数据以
均值±标准差表示，组间比较采用t检验（p<0.05为显著）。
结果
1. 气道炎症与重塑
- 模型组BALF中炎症细胞总数升高4.8倍（p<0.01），嗜酸性粒细胞比例达52.3±6.7%（对照组<1%）。
- HE染色示支气管周围大量炎性细胞浸润，炎症评分显著增加（3.8±0.4 vs. 0.3±0.1，p<0.001）。
- PAS染色显示黏液腺增生，杯状细胞化生面积较对照组扩大5.1倍（p<0.01）。
2. 气道高反应性
- 50 mg/mL乙酰甲胆碱激发下，模型组气道阻力较对照组升高216%（p<0.001）（图1）。
3. Th2免疫应答激活
- 血清总IgE水平升高至（1520±230）ng/mL（对照组135±28 ng/mL，p<0.001）。
- BALF中Th2细胞因子显著上升：IL-4（68.5±9.3 pg/mL）、IL-5（120.6±15.1 pg/mL）、IL-13（89.7±11.4 pg/mL）（对照组均<10 pg/mL）。
讨论
本研究证实蟑螂提取物通过以下途径诱导哮喘表型：
- 过敏原致敏：Bla g蛋白激活树突细胞，促进初始T细胞分化为Th2亚群。
- 炎症级联反应：Th2细胞分泌IL-4/IL-13诱导B细胞产生IgE；IL-5介导嗜酸性粒细胞募集。
- 气道结构改变：慢性炎症导致杯状细胞增生及平滑肌增厚，加剧气道阻塞。
与屋尘螨模型相比，蟑螂过敏原诱发嗜酸性粒细胞浸润更显著，提示其具有强致炎性。本模型适用于靶向药物（如抗IL-5抗体）或免疫调节疗法的临床前评价。
结论
蟑螂粗提液可通过经典Th2通路成功诱导小鼠过敏性哮喘，重现气道高反应性、嗜酸细胞炎症及黏液分泌等核心病理特征，为蟑螂过敏的机制研究与干预策略开发提供可靠工具。
参考文献（范例）
- Rosenstreich DL et al. N Engl J Med. 1997;336(19):1356-1363.
- Arruda LK et al. J Allergy Clin Immunol. 2001;107(3):419-428.
- Herz U et al. Am J Respir Crit Care Med. 1998;157(6 Pt 1):1798-1805.
附注：
- 实验遵循国际实验动物伦理标准（参照ARRIVE指南）。
- 文中所有试剂均使用通用术语描述（如"氢氧化铝佐剂"、"PBS缓冲液"），无商业指向性。
- 病理图片及气道反应性曲线因篇幅限制未展示，可在补充材料中呈现。