压力蒸汽灭菌效果化学指示物测试指南
前言
压力蒸汽灭菌是医疗器械再处理的核心环节，其有效性直接关乎患者安全。化学指示物作为灭菌过程的关键监测工具，通过直观的物理或化学变化，为灭菌关键参数（温度、时间、蒸汽饱和度）的达成提供即时、可见的验证证据。本指南旨在规范化学指示物的正确使用方法与结果判读标准。
一、 化学指示物定义与原理
化学指示物是一种含有对灭菌关键参数（主要是温度、时间，以及蒸汽的存在与饱和度）敏感的化学物质的装置。在灭菌过程中，这些化学物质发生不可逆的物理或化学变化（最常见的表现为颜色变化），显示该物品是否暴露于特定的灭菌条件下。
- 核心原理： 利用热敏染料、化学物质（如硫化合物、金属盐等）在特定温度、时间及饱和蒸汽环境下发生熔融、固化或化学反应，导致颜色或形态发生预设的改变。
二、 化学指示物分级（依据 ISO 11140 标准）
不同级别的指示物监测不同范围的灭菌参数：
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过程指示物（ISO Class 1）：
- 用途： 用于单个灭菌包外部，仅指示该包裹是否经过灭菌过程（区别于未灭菌物品）。不能证明灭菌成功。
- 变化： 通常由浅色变为深色（如米色变黑色）。
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特定测试指示物（ISO Class 2）：
- 用途： 主要用于灭菌器特定性能测试（如 B-D 测试），专门检测预真空灭菌器在灭菌周期开始阶段去除空气的能力（冷空气团问题）。
- 变化： 特定的均匀颜色变化图案（如由米色均匀变为墨绿色/黑色）。
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单参数指示物（ISO Class 3）：
- 用途： 仅监测一个关键参数（通常为温度），反应点接近但略低于灭菌温度。
- 变化： 指示是否达到了预设的临界温度。
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多参数指示物（ISO Class 4）：
- 用途： 同时监测两个或多个关键参数（最常见的是温度和时间）。设计反应点接近灭菌周期所需的参数（如 121℃ 或 134℃ 下维持特定时间）。
- 变化： 颜色达到或超过预设的合格标准线/区域。常用于包内监测。
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综合指示物（ISO Class 5）：
- 用途： 设计用于模拟生物指示物的抗力（对温度、时间和蒸汽饱和度敏感）。其反应终点（如颜色变化、化学物质移动）对应特定的存活曲线值或杀灭时间（如达到 10^6 的杀灭效果）。是监测灭菌周期有效性的最高级别化学指示物。
- 变化： 明显的、预设的终点（如染料条完全穿透窗口、颜色均匀变化至终点）。
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循环验证指示物（ISO Class 6）：
- 用途： 模拟特定灭菌周期的精确时间-温度曲线。用于灭菌过程的性能鉴定和定期再鉴定（PQ/OQ）。
- 变化： 通常提供量化的数值输出（如化学物质移动距离），需与预设的标准曲线比对。
三、 化学指示物测试步骤详解
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选择与确认：
- 根据测试目的（如包外指示、包内监测、B-D测试、周期验证）选择对应ISO级别的指示物。
- 核对兼容性： 确保所选指示物适用于该灭菌器类型（如重力下排式、预真空式）和设定的灭菌参数（尤其是温度：121°C 或 134°C）。
- 检查有效期与包装： 指示物必须在有效期内，且外包装完好无损、无污染。使用前仔细阅读制造商说明（注意：此处指技术说明，不涉及品牌）。
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放置位置：
- 包外指示物： 放置于灭菌包或容器外部、灭菌胶带或包装材料的明显位置。
- 包内指示物：
- 放置于灭菌包或托盘内部最难被蒸汽穿透的位置（通常是器械盘中心、管腔器械内部、敷料包中心、带盖容器的下层等）。
- 避免直接接触器械尖锐部分或金属表面，防止阻碍蒸汽穿透或损坏指示物。
- B-D 测试指示物： 严格按规范放置于标准测试包（通常为纯棉手术巾折叠制成）的中心位置。测试包水平放置在灭菌器架的前下方、近门处、排气口上方（具体位置需参照灭菌器说明书或标准）。
- 综合指示物/循环验证指示物： 放置位置需符合验证方案要求，通常也需置于负载中最难灭菌的位置。
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运行灭菌周期：
- 按灭菌器标准操作规程装载其他物品（B-D测试时通常单独运行测试包）。
- 运行选定的灭菌程序（如 121°C， 15-30分钟；或 134°C， 3-5分钟；B-D测试必须使用特定的134°C， 3.5-4分钟的预真空程序）。
- 确保灭菌周期参数设置正确无误。
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取出与冷却：
- 灭菌周期结束后，待灭菌室内压力降至零，温度降至安全范围（通常≤80°C）后再打开灭菌器门。
- 小心取出灭菌包和其中的化学指示物。避免在高温状态下立即判读结果（某些指示物高温下颜色可能不稳定）。
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观察判读：
- 在指示物冷却至室温（按说明书要求时间）后立即进行判读。
- 仔细比对： 将指示物显示的结果（颜色、形态变化、移动距离）与该指示物自带的合格标准进行严格比对。
- 明确终点：
- 过程指示物： 有显著颜色变化（如变黑）即为“暴露”。
- B-D 测试指示物： 颜色变化必须均匀一致地达到或深于标准色块。中心区域与边缘区域颜色一致，无任何条纹、斑点或未变色区域。
- 包内指示物（多参数/综合）： 颜色变化必须清晰、完全地达到或超过预设的终点线/区域/参考色块。对于“爬行式”（如化学物质沿毛细管移动）指示物，移动距离必须达到预设终点标记线。
- 循环验证指示物： 需根据制造商提供的标准曲线和读数工具，精确测量变化数值（如移动长度）并判定是否符合预设范围。
四、 结果判定与记录
- 合格： 指示物变化结果清晰无误地达到或超过产品自带的合格标准。
- 不合格：
- 无变化（未经历灭菌过程）。
- 变化不充分（未达到合格标准，如颜色浅于标准、移动距离不足）。
- 变化不均匀（如B-D测试出现条纹、斑点、中心未变色）。
- 记录：
- 必须详细记录： 灭菌器编号、灭菌日期及时间、灭菌周期参数（温度、时间、压力）、化学指示物类型（ISO级别）、放置位置、批号/有效期、测试结果（合格/不合格）。
- 不合格处理： 立即标记该批次所有灭菌物品为“未灭菌”，不得发放使用。查找根本原因（如操作错误、灭菌器故障、蒸汽质量问题、指示物失效、装载不当等），采取纠正措施，重新灭菌并测试合格后方可放行。对不合格的B-D测试，该灭菌器在问题解决并通过新的B-D测试前不得用于灭菌。
五、 关键注意事项
- 非生物指示物替代品： 化学指示物（即使是ISO Class 5/6）不能替代生物指示物进行定期的灭菌器效果监测（如每周空载测试）。两者应结合使用。
- 正确解读： 化学指示物合格仅表示该物品暴露于达到了预设关键参数的灭菌条件下，并非绝对保证无菌。生物负载、包装材料、装载方式等因素同样影响最终无菌效果。
- 包内监测至关重要： 包内化学指示物（特别是Class 4或5）是确认蒸汽是否有效穿透至负载内部最难灭菌部位的最直接证据。
- 规范操作： 严格遵循说明书、行业标准和灭菌器操作规程。错误的放置位置或判读方法会导致误导性结果。
- 存储条件： 按说明书要求储存指示物（通常要求避光、防潮、常温），避免极端环境（高温、高湿、冷冻）影响其性能。
- 不与器械混放： 确保指示物不会污染器械，也不会被器械损坏或干扰蒸汽穿透。
- 结果唯一性： 化学指示物是一次性使用的监测工具，结果不可逆转。一旦判读后，即使后续颜色可能缓慢变化，也仅以规定冷却时间后的首次判读为准。
结论
规范运用化学指示物进行测试，是保障压力蒸汽灭菌效果监测体系不可或缺的重要环节。深刻理解不同级别指示物的原理、用途及局限，严格遵循标准化的操作流程与结果判读标准，并完整记录测试结果，是确保灭菌质量、防范感染风险的关键措施。务必牢记，化学指示物测试是综合灭菌保证体系（包含物理参数监测、化学监测、生物监测）中的有机组成部分，三者协同作用，方能最大程度地守护患者安全。