以下是一篇关于部分胆总管结扎（pBDL）诱导小鼠/大鼠肝纤维化模型的完整学术文章，内容严格避免涉及任何企业或商品名称：

部分胆总管结扎（pBDL）诱导肝纤维化动物模型的建立与应用

摘要

部分胆总管结扎（Partial Bile Duct Ligation, pBDL）是一种通过手术干预诱导胆汁淤积性肝损伤的经典动物模型，可稳定模拟人类胆道梗阻相关肝纤维化进程。该模型以可控的胆管阻塞引起胆管上皮细胞增生、炎症反应及胶原沉积，适用于胆道疾病相关肝纤维化机制研究和药物评价。本文系统阐述pBDL模型的建立方法、病理特征、适用场景及技术要点。

1. 引言

肝纤维化是慢性肝损伤的修复性反应，表现为细胞外基质（ECM）过度沉积。为研究胆道疾病（如原发性硬化性胆管炎、胆道闭锁）的纤维化机制，需建立可靠的胆汁淤积动物模型。pBDL通过选择性结扎部分胆总管分支，保留另一分支通畅，在诱导局部肝叶纤维化的同时避免动物急性肝功能衰竭，显著提高存活率。

2. 模型建立方法

2.1 实验动物

• 物种选择：成年雄性C57BL/6小鼠（18-22g）或SD/Wistar大鼠（200-250g）
• 术前准备：禁食6小时，自由饮水；手术台预热至37℃维持体温。

2.2 手术步骤

1. 麻醉：腹腔注射麻醉剂（如戊巴比妥钠）诱导麻醉。
2. 开腹：腹部剃毛消毒，沿腹中线作1.5cm（小鼠）或3cm（大鼠）切口。
3. 暴露胆总管：轻柔拨开肠管，定位胆总管（肝门区透明管状结构）。
4. 部分结扎：
   • 识别胆总管分叉为左右两支（小鼠）或肝叶分支（大鼠）。
   • 用无菌缝合线结扎其中一支胆管（通常选择左外侧叶胆管）。
   • 确保结扎紧密但避免管道撕裂（图1A）。
5. 关腹：生理盐水冲洗腹腔，缝合肌层与皮肤。

2.3 术后护理

• 单笼饲养，保暖至苏醒。
• 术后3天给予含抗生素的饮用水预防感染。
• 每日评估动物状态（活动度、伤口愈合）。

3. 纤维化进展与病理特征

3.1 时间进程

3.2 组织学验证

• 染色方法：
  • H&E：评估炎症浸润及胆管增生。
  • Sirius Red：胶原纤维定量（图1B）。
  • 免疫组化：α-SMA（活化的肝星状细胞标志物）、CK19（胆管上皮细胞）。
• 典型表现：
  • 结扎肝叶：门静脉区扩张，胆管数量增加（>10个/门静脉区），纤维间隔连接相邻门静脉区。
  • 非结扎肝叶：组织学基本正常，作为内对照。

4. 模型优势与局限性

4.1 核心优势

• 高度靶向性：病变局限于结扎肝叶，非结扎肝叶维持正常功能。
• 可重复性强：纤维化进展时间窗明确（14天达高峰）。
• 模拟人类疾病：病理特征与胆道梗阻性纤维化高度一致。

4.2 主要局限

• 技术要求高：胆管解剖结构微小（尤其小鼠），需熟练显微操作。
• 种属差异：大鼠胆管再生能力强于小鼠，纤维化程度更显著。
• 不适用于：非胆道源性纤维化（如酒精性、病毒性肝炎）。

5. 应用方向

1. 机制研究：
   • 胆管上皮-间质转化（EMT）在纤维化中的作用
   • 胆汁酸信号通路（如FXR、TGR5）调控机制
2. 药物评价：
   • 抗纤维化化合物（如FXR激动剂、抗氧化剂）疗效验证
   • 靶向胆管增生的基因治疗策略评估

6. 技术注意事项

1. 避免完全胆管结扎：完全结扎（BDL）易导致胆管破裂、腹膜炎及高死亡率。
2. 精准识别胆管分支：术中可经胆囊注射染料（如亚甲蓝）辅助定位。
3. 术后监测：血清生化指标（ALT、AST、总胆汁酸、碱性磷酸酶）动态评估肝损伤程度。

结论

pBDL模型通过精确模拟胆道梗阻的病理生理过程，为研究胆汁淤积性肝纤维化提供了稳定、可控的平台。其分区性病变特性允许研究者同时获取病变与正常肝组织样本，有助于深入解析纤维化进展中的分子事件。未来可结合基因编辑动物拓展其在靶点验证中的应用价值。

图1. pBDL模型关键步骤及病理表现

• A：小鼠胆总管分叉示意图（左：结扎分支；右：保留分支）。
• B：术后14天结扎肝叶Sirius Red染色（胶原纤维呈红色，×200）。

参考文献（示例，实际需补充完整）

1. Tag et al. Hepatology. 2015. (胆管反应机制)
2. Fickert et al. Gastroenterology. 2007. (pBDL病理标准化)
3. Popov et al. Lab Invest. 2010. (种属差异比较)

此版本严格遵循学术规范，未提及任何企业相关产品信息，适用于科研论文写作或实验方案设计。