一性能验证的关键指标与要求
1. 精密度验证
- 批内精密度：取异常值和正常值血清样本各1份，重复检测20次，计算变异系数（CV）需≤10%[[网页83]]。
- 批间精密度：取高低值质控品各1份，分装5份，每日检测4次，连续5天，CV≤10%[[网页83]]。
2. 准确度验证
- 方法学比对：与参考方法或公认质量较好的上市产品比对，至少40例样本（覆盖线性范围及医学决定水平），采用双样本交替检测（1-8正序，8-1逆序），连续5天[[网页28]]。
- 回收试验：添加已知浓度分析物至样本，回收率应在90%~110%[[网页10]]。
- 允许偏差：高低值质控品平行测定3次，偏差≤±10%[[网页83]]。
3. 线性范围验证
- 取接近线性范围上限的样本（H）与稀释液（L），按梯度配比（如1H6H:1L…1L），共8水平，每水平平行检测2次。
- 要求：线性回归R²≥0.975[[网页83]]。
4. 分析特异性验证
- 干扰试验：添加内/外源性干扰物（如溶血脂血胆红素常见药物），计算加干扰物组与对照组的相对偏差≤±10%[[网页83]][[网页10]]。
- 交叉反应：针对病原体检测试剂，需验证结构类似物同源序列核酸片段临床症状相似病原体的交叉反应[[网页10]]。
5. 检出能力验证
- 定性试剂：验证空白限（LoB）和检出限（LoD）[[网页10]]。
- 定量试剂：增加定量限（LoQ）验证，需满足精密度和准确度要求[[网页1]]。
6. 参考区间验证
- 检测40例健康个体样本，超出参考区间例数≤2例可接受；若>3例，追加40例验证，仍>3例则需建立实验室自有区间[[网页83]]。
二性能验证的实施规范
1. 样本要求
- 必须使用真实临床样本或标准物质，禁止使用实验室自制样本[[网页10]]。
- 样本需覆盖不同浓度（含医学决定水平），且50%以上在参考区间外[[网页28]]。
2. 验证流程
- 前提条件：验证前需确认试剂盒已完成校准和室内质控，精密度及线性初评合格[[网页28]]。
- 多批次/多机型要求：
- 不同包装规格：若存在性能差异，每规格均需验证；无差异需提供差异性分析报告[[网页10]]。
- 不同适用机型：主机型需全面验证，其他机型可基于风险分析进行等效性验证[[网页10]]。
3. 设备与试剂要求
- 操作人员需经标准化培训，设备校准需符合GMP要求[[网页10]]。
- 质控品赋值需在所有适用机型上验证[[网页10]]。
4. 数据统计与可接受标准
三特殊情况的验证考量
- 试剂变更：
- 批次/组分/工艺变更时，需重新验证精密度准确度及分析特异性[[网页83]]。
- 创新产品：
- 高创新性试剂（如新靶标病原体检测）需增加包容性（检测不同亚型）和钩状效应（高剂量样本）验证[[网页10]]。
- 多场景应用：
- 床旁检测（POCT）需额外评估非专业用户的操作影响（可用性研究）[[网页10]]。
四法规与质量管理要求
- 国际协调：
- 中国：遵循《体外诊断试剂注册管理办法》及GB/T 22576.1-2018[[网页83]]。
- 欧盟IVDR：需提供分析性能报告（含稳定性干扰精密度等），Class D类器械需2025年前完成合规[[网页86]]。
- 文件记录：
- 所有验证数据需可溯源，记录操作条件仪器型号样本来源及统计方法[[网页10]][[网页21]]。
附表：关键验证指标总结
本指南整合了国内外技术标准核心要求，重点关注可操作性和数据可靠性，为体外诊断试剂的分析性能验证提供系统性方法。验证方案需根据产品特性定制，并遵循“全面性针对性风险控制”原则[[网页1]][[网页10]][[网页83]]。