抑菌效力检查是评价药品医疗器械及日化产品中抑菌成分抑制微生物生长能力的关键质量控制环节，其核心在于通过标准化试验验证产品在保质期内抵抗微生物污染的能力。以下是基于药典标准及专业方法的完整技术说明：
一抑菌效力的定义与重要性
抑菌效力指添加的抑菌剂（防腐剂）在特定浓度下抑制细菌真菌等微生物繁殖的能力。其重要性体现在：
- 安全防护：防止多剂量包装产品在使用过程中因微生物污染导致变质，降低用药风险 1 8。
- 质量控制：确保产品在有效期内维持稳定的微生物抑制能力，不因成分降解或包装吸附而失效 8。
- 法规要求：药典明确规定需考察注射剂眼用制剂鼻用喷雾等18类制剂的抑菌效力 1。
二核心检测方法
1. 药典标准方法（通则1121）
适用对象：无菌及非无菌制剂（注射剂眼用液软膏等）
8。 试验流程：- 菌种选择：
- 细菌：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）
- 真菌：白色念珠菌（Candida albicans）、黑曲霉（Aspergillus niger）
- 口服制剂需增加大肠埃希菌（Escherichia coli） 8。
- 菌液制备： 将菌悬液浓度调至约10⁸ CFU/mL，接种至供试品中，使终浓度达10⁵~10⁶ CFU/g(mL)，接种体积≤1%。
- 存活菌数测定： 按预定时间点（如6h24h7d14d28d）取样，分别用胰酪大豆胨琼脂（细菌）和沙氏葡萄糖琼脂（真菌）培养计数，计算lg值下降幅度 8。
表：抑菌效力评价标准（示例）
注：“A级”为常规标准，“B级”适用于抑菌剂毒性较高的情况。
2. 其他常用方法
- 稀释法（定量）： 测定最低抑菌浓度（MIC），通过肉汤或琼脂倍比稀释抑菌剂，观察抑制微生物生长的最低浓度 2 18。
- 扩散法（定性）： 如抑菌环试验，适用于溶出型抑菌产品，抑菌环直径与抑菌效力正相关 18。
- 振荡烧瓶法/浸渍法： 分别用于非溶出型纺织品（如抗菌纤维）和溶出型抗菌织物 18。
三关键影响因素与实验规范
- 培养基适用性：
- 使用前需验证胰酪大豆胨培养基（细菌）和沙氏葡萄糖培养基（真菌）的促生长能力，菌落回收率需≥70% 8。
- 菌种质量控制：
- 菌株传代不超过5代，防止生物学特性变异；黑曲霉孢子悬液需含聚山梨酯80助分散。
- 容器相容性：
- 优先在原包装内测试，避免材质（如玻璃吸附）或pH变化干扰结果。
- 中和剂选择：
- 杀菌试验中需添加适宜中和剂终止抑菌剂残留活性，否则导致假阴性 18。
四适用产品范围与局限性
- 适用产品： 多剂量注射剂滴眼液外用软膏抗菌纺织品塑料表面抗菌处理等 1 18。
- 不可替代的环节： 抑菌剂不能替代GMP管理，亦不可作为非无菌制剂唯一防污染手段 1 8。
- 局限性： 该方法仅验证未启封产品的抑菌效力，使用过程中的污染风险需结合其他措施控制 8。
五总结
抑菌效力检查通过定量微生物挑战试验，确保产品中抑菌剂的添加浓度兼具有效性与安全性。其核心在于严格遵循药典方法控制实验条件（菌种活性培养基质量容器兼容性），并依据产品类型选择对应评价标准。未来研究需关注新型微生物的纳入及快速检测技术的开发，以提升方法的覆盖范围与效率。
参考资料：中国药典通则1121JIS Z2801ASTM E2149消毒技术规范等
12818。