一次性使用卫生用品阴道黏膜刺激试验技术规范
1. 目的与适用范围
本试验旨在评估一次性使用卫生用品（如卫生棉条、月经杯、女性护理液等）或其浸提液与阴道黏膜接触后可能产生的局部刺激性反应，为产品生物安全性评价提供依据。适用于需接触阴道黏膜的各类卫生用品的上市前安全性评估。
2. 试验原理
通过模拟产品实际使用条件，将受试品或其浸提液直接接触实验动物（常用家兔）阴道黏膜，观察接触后局部组织的红斑、水肿、分泌物异常等宏观反应，并通过组织病理学检查评估黏膜上皮完整性、炎性细胞浸润、血管充血等微观变化，综合判断产品的刺激性强度。
3. 试验材料与设备
- 受试品：按产品说明书要求制备（如液体产品原液使用，固体产品用生理盐水浸提）。
- 对照样品：
- 阴性对照：生理盐水或无刺激性溶剂（如精制水）。
- 阳性对照：已知轻度刺激物（如2%醋酸溶液）。
- 实验动物：健康成年雌性家兔（常用新西兰白兔），体重≥2.5kg，试验前适应性饲养≥5天。
- 主要仪器：阴道插管装置、注射器、手术器械、光学显微镜、组织处理系统。
4. 试验步骤
4.1 动物分组与标识
- 至少设3组（n≥3只/组）：
- 受试品组
- 阴性对照组
- 阳性对照组
- 动物编号标记，试验前24h剃除外阴部毛发。
4.2 给药处理
- 频率与周期：每日1次，连续给予5天。
- 操作流程：
- 动物仰卧固定，轻柔清洁外阴。
- 使用无菌插管将1mL受试液/对照液注入阴道深处（深度约7.5cm）。
- 保持动物头低位5分钟防止液体流出。
4.3 临床观察
- 每日给药前及末次给药后24h、48h、72h观察：
- 阴道口红肿、分泌物（量、颜色、性状）
- 动物行为异常（如舔咬、躁动）
- 全身不良反应（体重、进食量）
4.4 病理学检查
- 解剖取材：末次观察后72h安乐死动物，完整取出阴道组织。
- 制片与染色：福尔马林固定 → 石蜡包埋 → HE染色。
- 组织学评估（盲法阅片）：
- 上皮层：完整性、角化、坏死
- 基质层：炎性细胞浸润密度、类型
- 血管：充血、出血
- 腺体结构改变
5. 评分标准
5.1 宏观评分（McDonald法）
5.2 组织学评分（半定量）
6. 结果判定
试验结论有效性前提：阳性对照组应出现显著刺激反应（宏观评分≥3分），阴性对照组评分≤0.4分。
7. 试验局限性
- 动物模型存在种属差异，不能完全替代人体反应。
- 未考虑长期累积效应或免疫反应。
- 需结合细胞毒性试验、致敏试验等进行全面风险评估。
8. 参考文献
- ISO 10993-10:2021《医疗器械生物学评价第10部分：刺激与皮肤致敏试验》
- 《化妆品安全技术规范》（阴道黏膜试验章节）
- OECD TG 406 (Skin Irritation/Corrosion)
本技术文件严格依据国际标准编写，内容聚焦于试验方法学及评价体系，适用于行业规范性参考。具体产品测试需在具备GLP资质的实验室，由专业毒理学家根据产品特性设计试验方案。