重复损伤性斑贴试验 (HRIPT)：评估产品皮肤安全性的关键方法
重复损伤性斑贴试验（Human Repeated Insult Patch Test， HRIPT）是一种严谨的临床皮肤安全性评价方法，主要用于评估化妆品、护肤品、外用药品、家用化学品、纺织品以及工业原料等物质在重复使用条件下，对正常人体皮肤产生刺激性和诱发过敏性接触性皮炎（即皮肤致敏）的潜在可能性。
HRIPT的核心目的
- 预测皮肤致敏风险： 这是HRIPT的首要目标，识别受试物是否具有使人体免疫系统致敏的能力，从而可能在后续接触时引发过敏反应。
- 评估累积刺激性： 检测在多次重复接触后，受试物对皮肤产生的累积性刺激效应（非免疫介导）。
- 支持产品安全声明： 为新配方或含新成分的产品上市提供重要的皮肤安全性数据支持。
HRIPT的标准测试流程
HRIPT通常遵循严格的标准化方案，主要分为两个关键阶段：
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诱导期：
- 受试者筛选： 招募足够数量（通常50-200人）符合标准的健康成年志愿者。排除标准包括：已知对测试物质或其成分过敏、广泛性皮肤病、测试部位皮肤异常、免疫系统疾病、怀孕哺乳、近期使用免疫抑制剂或抗组胺药、以及测试部位有晒伤或过度日晒等。所有受试者均需签署知情同意书，且研究需经独立的伦理审查委员会批准。
- 斑贴应用： 将适当浓度的受试物（通常以封闭形式）敷贴于受试者上背部或上臂外侧的正常皮肤区域（常用斑贴器如Finn Chamber）。
- 重复接触： 在诱导期内，通常进行 9-15次 重复斑贴应用，频率多为每周3次（如周一、周三、周五）。每次斑贴持续 24或48小时。
- 皮肤反应评分： 在每次去除斑贴后约30分钟至1小时（让红斑消退），由经过培训的研究人员使用标准化的评分系统（如ICDRG标准）对斑贴部位皮肤反应进行评分：
- 0级： 无反应。
- 1级： 微弱、边界不清的红斑。
- 2级： 中度、边界清晰的红斑。
- 3级： 重度红斑，常伴水肿。
- 4级： 重度红斑伴水肿和水疱/大疱。
- 休息期： 在最后一次诱导斑贴去除后，设置一个 10-14天 的无接触休息期，旨在避免诱导期的刺激反应干扰后续挑战期的结果判断，并让潜在的致敏反应有时间发展。
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挑战期：
- 新部位挑战： 在休息期结束后，将受试物（与诱导期相同浓度）斑贴于受试者背部或手臂上一个未曾接触过受试物的新皮肤区域。
- 斑贴时间： 通常封闭斑贴 48小时。
- 反应判读：
- 首次判读： 在去除斑贴后约30分钟至1小时进行。
- 二次判读： 通常在去除斑贴后 24小时 或 48小时 再次进行判读（有时甚至在72小时）。二次判读非常重要，因为过敏反应可能延迟出现。
- 结果解读：
- 挑战部位出现红斑、水肿甚至水疱等反应（通常在2级或以上），且该受试者在诱导期未出现持续性或进行性加重的刺激反应，则高度提示发生了过敏性接触性皮炎（致敏阳性）。
- 如果反应仅出现在诱导部位（旧部位）而非挑战部位（新部位），则可能代表持续的刺激反应或“激怒现象”，而非真正的新致敏。
HRIPT的价值与意义
- 预测能力强： HRIPT被认为是预测人体皮肤致敏潜力的“金标准”或参考方法之一，其可靠性较高。
- 模拟实际使用场景： 通过多次重复接触，更贴近消费者日常重复使用产品的情况。
- 识别致敏原： 是识别新型化学物质或复杂混合物致敏性的关键工具。
- 安全性保障： 为产品配方的安全评估和风险管理提供至关重要的科学依据，降低消费者使用后出现不良反应的风险。
- 符合伦理的替代： 作为人体临床试验，其设计需严格遵守伦理规范，并在一定程度上取代了过去部分动物实验（如豚鼠最大化试验 GPMT）。
HRIPT的局限性
- 假阳性和假阴性： 尽管是金标准，但仍存在假阳性（如高强度刺激被误判为过敏）和假阴性（未能诱发敏感个体过敏）的可能性。特别是对弱致敏剂。
- 不适用于高度刺激物或腐蚀物： 强刺激物会干扰结果解读，并可能对受试者造成不必要的伤害。此类物质通常不适合HRIPT或需要极低浓度。
- 受试者个体差异： 人群的敏感性存在差异，测试结果代表所选人群的反应，存在一定的不确定性。
- 成本与时间： 需要招募和管理大量志愿者，研究周期较长（通常6-10周），成本相对较高。
- 伦理考量： 测试本身存在诱发过敏反应的固有风险。严格的伦理审查和知情同意是绝对必要的。志愿者权益保护是首要原则。
总结
重复损伤性斑贴试验（HRIPT）是评估产品（尤其是需反复接触皮肤的产品）安全性的核心临床测试方法。通过标准化的诱导期（多次重复接触）和挑战期（在新部位测试），其主要目标是预测受试物引起人体皮肤过敏（致敏）和累积刺激的风险。虽然存在一定的局限性和成本，但其在识别潜在致敏原、保障消费者安全、支持产品合规上市方面发挥着不可替代的关键作用。所有HRIPT研究必须严格遵守国际通行的伦理准则和科学规范，确保受试者安全和数据的可靠性。