鼻炎(大/小鼠)

发布时间:2025-06-03 17:14:37 阅读量:10 作者:生物检测中心

以下是关于大/小鼠鼻炎模型的完整研究框架,重点聚焦于 检测项目,适用于科研设计与论文撰写参考:

鼻炎(大/小鼠)模型研究:核心检测项目详解

鼻炎动物模型的评价需多维度指标结合,以下按检测类别分类阐述:

一、行为学与临床症状

  1. 鼻部症状评分

    • 抓挠次数:记录单位时间内(如30min)鼻部抓挠或摩擦次数。
    • 喷嚏频率:计数激发后一定时间内的喷嚏次数(需高清录像辅助)。
    • 鼻分泌物量:滤纸片称重法(贴于鼻孔吸收分泌物)。
  2. 呼吸功能(需专用设备)

    • 鼻腔气道阻力(Rna):通过强迫振荡技术测量。
    • 肺功能检测:如增强呼气间歇(Penh)评估气道高反应性。

二、组织病理学检测

  1. 鼻黏膜组织切片(HE染色)

    • 炎症细胞浸润:嗜酸性粒细胞/中性粒细胞/淋巴细胞计数(高倍镜下)。
    • 黏膜病理变化:上皮增厚、杯状细胞增生、腺体扩张、基底膜增厚评分。
  2. 特殊染色与免疫组化

    • PAS染色:杯状细胞化生定量(黏液分泌细胞占比)。
    • 免疫组化
      • 炎症因子:IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α表达定位。
      • 黏蛋白:MUC5AC阳性细胞计数。
      • 免疫细胞标志:CD4+ T细胞、肥大细胞(类胰蛋白酶染色)。

三、体液与细胞因子分析

  1. 血清学检测

    • 特异性IgE/IgG1:ELISA法(OVA致敏模型需测抗OVA抗体)。
    • 总IgE水平:评估全身过敏状态。
  2. 鼻腔灌洗液(NALF)分析

    • 炎症介质
      • 细胞因子:IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ, IL-17(Luminex/ELISA)。
      • 趋化因子:Eotaxin(CCL11)、RANTES(CCL5)。
    • 细胞分类计数:嗜酸性粒细胞/中性粒细胞/淋巴细胞比例(Diff-Quik染色)。
  3. 局部组织匀浆

    • 转录水平:qPCR检测鼻黏膜中IL-4, IL-5, IL-13, TNF-α等mRNA表达。

四、分子机制检测

  1. 信号通路关键蛋白

    • Western Blot检测:
      • NF-κB p65核转位
      • p-STAT6(Th2通路)
      • MAPK通路蛋白(p38/JNK/ERK)
  2. 转录因子活性

    • EMSA或ChIP-PCR检测NF-κB/DNA结合活性。

五、神经源性炎症相关

  1. 神经肽检测

    • 免疫组化/ELISA:
      • P物质(SP)
      • 降钙素基因相关肽(CGRP)
    • 受体表达:NK-1R(SP受体)免疫荧光定位。
  2. 感觉神经元功能

    • 鼻黏膜敏感性:辣椒素(CAP)激发试验测量喷嚏/抓挠反应。

六、鼻腔微环境与屏障功能

  1. 黏液分泌评估

    • 黏液层厚度:阿辛蓝染色结合图像分析。
    • 黏蛋白基因:qPCR检测MUC5AC/MUC5B表达。
  2. 上皮屏障完整性

    • 紧密连接蛋白:ZO-1、Occludin免疫荧光/免疫印迹。
    • 通透性检测:异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖鼻腔灌注后血清荧光强度测定。

七、高级影像学与功能学

  1. 活体成像

    • 小动物MRI:评估鼻窦炎模型黏膜增厚/积液。
    • 生物发光:转基因报告基因示踪炎症细胞迁移。
  2. 纤毛运动功能

    • 黏膜纤毛清除率:炭粒或荧光微球排出时间测定。

检测项目选择建议

关键注意事项

  1. 模型一致性:OVA/LPS/HDM等造模剂选择需匹配检测指标(如LPS模型侧重中性粒细胞)。
  2. 动态时间点:急性期(24-72h)测细胞因子,慢性期(>4周)评估重塑。
  3. 种属差异:大鼠更适鼻腔灌洗,小鼠更宜基因编辑研究。

完整研究流程示例致敏+激发造模 → 行为学评分 → 采集血清/NALF → 安乐死后取鼻黏膜 → 分装用于HE/PAS/IHC/WB/qPCR → 数据整合分析。

通过多维度检测可全面解析鼻炎病理机制,建议根据研究目标选择≥3类指标交叉验证,提升结果可靠性。