以下是为大/小鼠白内障研究整理的完整技术指南,重点聚焦于检测项目与方法,适用于药物评价、疾病机制研究及模型验证:
一、核心检测项目分类
(1) 形态学检测(核心指标)
(2) 功能性检测
- 视觉行为学测试
- 视动反应(OKR):条纹转鼓系统,记录头部追踪次数(反映视敏度)
- 避暗实验:光照环境逃避延迟时间(需排除运动功能干扰)
- 视网膜电图(ERG):检测a/b波振幅降低(继发性视网膜功能损伤)
(3) 分子与生化检测
MarkDown1. **氧化应激** - 晶状体SOD、CAT、GSH-Px活性 ↓ - MDA、8-OHdG含量 ↑(脂质/DNA氧化损伤) 2. **蛋白变性** - 水溶性/不溶性蛋白比例(离心法) - 热休克蛋白(HSP70, αB-晶状体蛋白)Western blot 3. **细胞凋亡** - TUNEL染色(晶状体上皮细胞凋亡率) - Caspase-3活性检测 4. **钙离子稳态** - 荧光探针(如Fluo-4 AM)检测晶状体[Ca²⁺]i - 钙ATP酶(SERCA)活性 ↓
二、关键操作流程示例(裂隙灯评分)
Python# 伪代码:晶状体混浊度量化分析 def lens_opacity_score(image): gray_img = cv2.cvtColor(image, cv2.COLOR_BGR2GRAY) roi = select_central_region(gray_img) # 选择中央光学区 intensity = np.mean(roi) # 平均灰度值 if intensity < 30: return 0 # 透明 elif intensity < 70: return 1 # 轻微混浊 elif intensity < 120: return 2 # 中度混浊 else: return 3 # 重度混浊
三、模型构建与检测时间窗
关键提示:需设置基线值(造模前)及动态监测点(如D1,3,7,14)
四、数据报告规范
- 形态学:混浊面积占比(%)、LOCS评分均值±SD
- 分子数据:活性单位/μg蛋白(如SOD: U/mg prot)
- 相关性分析:混浊度 vs 氧化指标(Pearson相关系数)
五、干扰控制要点
- 麻醉深度:过量麻醉导致角膜干燥影响观察
- 瞳孔大小:未充分扩瞳导致周边混浊漏诊
- 离体时间:摘除后>30min可能发生自体水解
完整研究框架应包含: 造模组/对照组设计 → 动态形态监测 → 终末功能检测 → 分子机制验证 → 组织病理(HE染色)
根据具体研究目标(如药物筛选、基因治疗验证),可侧重选择快速表型筛查(裂隙灯+OCT)或深入机制检测(氧化应激+蛋白聚集分析)。