一、模型建立核心步骤
1. 靶向定位
- 黑质致密部（SNc）：精准损毁多巴胺能神经元（AP坐标：大鼠 -4.8～-5.3mm；小鼠 -2.8～-3.2mm）
- 内侧前脑束（MFB）：高效阻断DA通路（AP：大鼠 -4.4mm；小鼠 -1.2mm）
- 纹状体（STR）：局部模拟早期病变（AP：大鼠 +1.0mm；小鼠 +0.5mm）
2. 神经毒素注射
- 6-OHDA剂量（溶于0.02%抗坏血酸生理盐水）：
- 大鼠SNc/MFB：8-20μg（2μL/min，留针5min）
- 小鼠SNc/MFB：2-8μg（0.5μL/min）
- 纹状体：3-10μg（大鼠），1-4μg（小鼠）
3. 术后管理
- 抗生素预防感染（如恩诺沙星5mg/kg）
- 镇痛处理（布托啡诺1-2mg/kg）
- 恒温恢复（28℃直至清醒）
二、核心检测项目体系
▶ 行为学验证（模型有效性核心）
▶ 运动功能评估（表型分析）
▶ 分子与组织学验证
▶ 电生理学检测（可选）
- 基底节神经元放电：丘脑底核（STN）不规则爆发放电↑，黑质网状部（SNr）放电频率↑
- 皮质-纹状体LTP：高频刺激诱导的LTP幅度↓>40%
三、关键时间节点控制
四、模型验证标准（必须满足）
- 旋转行为：阿扑吗啡诱导转速 >210圈/30min（大鼠）或 >60圈/30min（小鼠）
- TH阳性细胞损失：同侧SNc TH+神经元 <20%残留
- DA耗竭：同侧纹状体DA含量 <15%对照侧
五、常见问题对策
- 旋转行为阴性：验证注射坐标（CT/MRI辅助定位），增加6-OHDA剂量（不超过20μg大鼠/8μg小鼠）
- 高死亡率：改用纹状体注射，降低流速至0.25μL/min，术中使用地塞米松（0.2mg/kg）
- 非特异性损伤：严格控制注射体积（大鼠≤2μL，小鼠≤1μL），术后72h监测体温
注：建议使用雄性SD大鼠（220-250g）或C57BL/6小鼠（25-30g），老年模型选用12月龄以上动物。所有行为学检测需在固定昼夜节律时段（如9:00-12:00）进行。
此框架已整合最新《Nature Protocols》优化方案（2023），适用于神经保护剂筛选、深部脑刺激评估及细胞治疗研究。