回收率质控检测

发布时间：2026-04-16 阅读量：33 作者：生物检测中心

回收率质控检测：原理、步骤与应用

一、定义与目的

回收率（Recovery Rate）是指通过特定分析方法检测时，向实际样品中加入已知量的目标物质（标准品）后，所测得该物质的量占加入量的百分比。其计算公式为：

回收率 (%) = [(C<sub>测得</sub> - C<sub>本底</sub>) / C<sub>加入</sub>] × 100%

  • C<sub>测得</sub>：加标样品的测定浓度
  • C<sub>本底</sub>：未加标样品（本底样品）中目标物质的浓度
  • C<sub>加入</sub>：加入目标物质的理论浓度
 

核心目的：

  1. 评估方法准确性： 反映分析方法在特定基质（如土壤、水体、食品、生物样本等）中准确测定目标物质的能力。高回收率表明方法受基质干扰小、操作误差低。
  2. 验证方法可靠性： 确认方法在常规运行条件下能否稳定获得可靠结果，是方法验证与确认的关键环节。
  3. 监控实验室性能： 作为常规质量控制的指标，识别实验过程中是否存在系统误差或操作偏差。
  4. 满足合规要求： 国内外标准（如ISO/IEC 17025、GB/T 27404等）均要求定期进行回收率测试。
 

二、关键实验设计

  1. 基质选择：

    • 使用与实际样品尽可能一致的基质。
    • 若基质多样，需覆盖主要类型进行测试。
    • 确保基质本身不含或仅含极低水平目标物（否则需准确测定本底值）。

  2. 浓度水平设定：

    • 至少测试两个浓度水平：接近方法定量限（LOQ） 和 接近预期样品浓度或标准上限。
    • 对于宽浓度范围的分析，可增加中间浓度点。
    • 加标量应显著高于本底值，避免本底误差过大影响结果。

  3. 平行样与重复：

    • 每个浓度水平至少制备并测定 2份平行加标样品（A、B）。
    • 同时测定 2份平行未加标样品（本底样品）（C、D）。
    • 所有样品应在同批次内进行分析，以消除批次间差异。
 

三、实验操作步骤

  1. 样品制备：

    • 准确称取或量取若干份代表性基质样品。
    • 其中两份作为 本底样品（C、D），不进行加标。
    • 其余份作为 加标样品（A、B），加入精确体积的标准溶液（浓度已知），使达到预设的加标浓度（C<sub>加入</sub>）。
    • 确保加标操作均匀，必要时混匀或放置使其平衡。

  2. 样品处理与分析：

    • 所有样品（A、B、C、D）按照标准分析方法进行完全相同的样品前处理（提取、净化、浓缩等）和仪器分析。
    • 记录所有测定值。

  3. 数据计算：

    • 计算每对平行样的平均值：
      • C<sub>本底(平均)</sub> = (C<sub>C</sub> + C<sub>D</sub>) / 2
      • C<sub>测得(平均)</sub> = (C<sub>A</sub> + C<sub>B</sub>) / 2
    • 代入公式计算回收率：

      回收率 (%) = [(C<sub>测得(平均)</sub> - C<sub>本底(平均)</sub>) / C<sub>加入</sub>] × 100%

 

四、结果判定与可接受标准

  1. 设定控制限：

    • 通常基于方法验证数据、历史数据、标准要求或统计方法（如Horwitz方程）设定。
    • 常见示例（具体需依据方法和领域）：
      • 常规分析： 可接受范围常为 80% - 120%。
      • 痕量分析（接近LOQ）： 可放宽至 60% - 140%。
      • 复杂基质或特定标准： 可能要求 70% - 110% 或更窄。
    • 实验室应明确规定其各检测项目的回收率可接受标准。

  2. 判定：

    • 若计算得到的回收率落在预设的可接受范围内，表明该批次/该浓度水平的分析过程在准确性方面受控。
    • 若回收率超出可接受范围，则视为失控，需启动调查并采取纠正措施。

  3. 统计处理（可选但推荐）：

    • 进行多次回收率试验后，可计算平均回收率及其置信区间、标准偏差（SD）或相对标准偏差（RSD），以更全面评估方法的准确度和精密度。
 

五、在质量控制中的应用

  1. 日常质量控制（QC）：

    • 作为每批次样品分析的必备质控样。
    • 频率：通常每批样品（或每10-20个样品）插入1-2个加标样品（不同浓度或不同基质）。
    • 控制图： 将每次的回收率结果绘制在时间序列控制图上（如均值±2SD或±3SD作为警戒限和控制限），直观监控方法的长期稳定性，发现潜在趋势或漂移。

  2. 方法验证与确认：

    • 在新方法建立或引入时，需系统测试不同基质和浓度水平的回收率，证明方法的准确度满足要求。
    • 方法变更（如仪器、前处理步骤）后，需重新确认回收率。

  3. 人员培训与能力监控：

    • 考核新上岗或转岗人员分析加标样品的能力。
    • 定期进行人员比对（不同人员分析相同加标样）。
 

六、影响回收率的因素与改进

  • 基质效应： 样品中的共存物干扰目标物的提取、分离或检测。改进：优化前处理（如更有效的净化）、采用基质匹配校准、同位素内标法。
  • 前处理损失： 提取不完全、吸附、挥发、降解等。改进：优化提取溶剂/条件、添加保护剂、控制温度与时间、缩短操作步骤。
  • 加标操作误差： 加标体积不准确、混匀不均。改进：使用经校准的精密移液器、充分混匀。
  • 标准品问题： 标准品纯度不足、浓度不准、配制错误或降解。改进：使用有证标准物质、规范配制与保存。
  • 仪器分析问题： 仪器状态不佳、校准不当、参数设置错误。改进：定期维护校准仪器、优化方法参数。
  • 数据处理错误： 本底扣除错误、计算失误。改进：规范数据记录与计算流程。
 

七、结论

回收率质控检测是衡量分析方法准确性和实验室检测质量的核心工具。通过科学设计实验、严格执行操作、准确计算数据并依据明确标准进行判定，回收率测试能有效监控分析过程的可靠性，识别并纠正潜在问题。将其纳入日常质量控制体系（如控制图），结合其他质控手段（如空白、平行样、标准物质等），是保证检测数据准确、可靠、满足法规与客户要求的基石。实验室必须建立完善的回收率质控程序并持续监控其有效性。

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