脑缺血再灌注损伤动物模型（大/小鼠）构建及关键检测项目
一、模型简介
脑缺血再灌注（I/R）损伤是指脑组织在缺血一段时间后恢复血流供应，反而导致组织损伤加重的病理现象。该模型广泛应用于研究脑卒中（如脑梗死）、创伤性脑损伤、心脏骤停后脑损伤等疾病的机制及药物干预效果。
常用模型构建方法：
-
线栓法（MCAO模型）：
- 小鼠/大鼠大脑中动脉阻塞（Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO）
- 通过颈内动脉插入硅胶线栓阻塞大脑中动脉起始部。
- 缺血时间：通常30–120分钟（小鼠）或60–180分钟（大鼠）。
- 再灌注：拔除线栓恢复血流。
-
双侧颈总动脉结扎（BCCAO）：
- 适用于全脑缺血研究（如血管性痴呆模型）。
- 结扎双侧颈总动脉 + 低血压（或加低氧）。
二、核心检测项目（按研究目的分类）
1. 模型成功性验证
2. 脑组织损伤程度评估
3. 细胞死亡与凋亡检测
4. 氧化应激与炎症反应
5. 血脑屏障（BBB）完整性
6. 神经功能恢复长期评估
7. 分子机制研究（可选）
-
Western Blot：
- 凋亡通路（Bcl-2/Bax, Cleaved Caspase-3）
- 自噬（Beclin-1, LC3-II/I）
- 炎症（NF-κB p65, NLRP3）
- 抗氧化通路（Nrf2, HO-1）
-
qRT-PCR：
- 炎症因子、凋亡基因、自噬相关基因表达
-
免疫荧光（IF）/ 免疫组化（IHC）：
- 共定位分析（如 NeuN + TUNEL）
- 蛋白空间分布（如 p-NF-κB 入核）
三、检测时间点设计建议
四、注意事项
- 品系差异：C57BL/6小鼠对缺血敏感，SV129品系梗死体积较小；SD大鼠比Wistar更常用。
- 温度控制：手术期维持体温37℃（避免低体温神经保护假象）。
- 随机分组：严格随机化，避免操作者偏倚。
- 假手术组：必须设置（仅暴露血管不插线/不结扎）。
- 伦理合规：遵循动物实验伦理指南（如ARRIVE 2.0）。
五、结果展示示例
Figure 1. 脑缺血再灌注后梗死体积与神经功能缺损 (A) TTC染色显示再灌注24h后大脑梗死区域（白色）； (B) mNSS评分显示模型组神经功能显著受损（*p<0.01 vs sham）； (C) Western Blot 显示 Cleaved Caspase-3 表达升高。
结论：脑I/R模型的检测需整合从分子到行为的多层次指标，以全面评价损伤机制及治疗策略的有效性。建议根据研究目标选择3–5个核心检测板块，避免数据冗余。
如需具体实验方案或某检测的详细Protocol，可进一步扩展！
注：本文适用于SCI论文写作、国自然基金申请及研究生课题设计。建议结合最新文献（2020–2023）更新分子靶点。