保健食品改善免疫功能低下引起的疲劳功效实验

保健食品改善免疫功能低下所致疲劳功效研究

摘要：
本研究旨在评估一款功能性保健食品原料对免疫低下模型动物疲劳状态的改善作用。通过建立环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠模型，结合负重游泳实验及多项生理生化指标检测，结果表明该保健食品能显著延长小鼠负重游泳时间，降低血清乳酸与尿素氮水平，提升肝糖原储备，同步改善免疫器官指数及炎症因子水平。证实其具有缓解免疫低下相关疲劳的潜在功效。

1. 引言
免疫功能低下是机体易疲劳的关键诱因之一。免疫系统过度消耗能量、炎症因子释放失调及代谢废物积累均可加剧疲倦感。针对免疫功能低下人群的疲劳问题，开发兼具免疫调节与抗疲劳功能的保健食品具有重要现实意义。本研究选用小鼠模型，模拟免疫低下状态，综合评价一种复合保健食品对抗疲劳的作用效果及潜在机制。

2. 材料与方法

• 2.1 实验动物与分组：

  • 健康清洁级ICR雄性小鼠60只，体重18-22g，随机分为：
    • 空白对照组： 生理盐水灌胃 + 生理盐水腹腔注射。
    • 模型对照组： 生理盐水灌胃 + 环磷酰胺（40mg/kg体重，隔日一次）腹腔注射。
    • 保健食品低剂量组： 保健食品（250mg/kg体重）灌胃 + 环磷酰胺处理。
    • 保健食品中剂量组： 保健食品（500mg/kg体重）灌胃 + 环磷酰胺处理。
    • 保健食品高剂量组： 保健食品（1000mg/kg体重）灌胃 + 环磷酰胺处理。
    • 阳性对照组： 某标准免疫调节剂（按说明书剂量）灌胃 + 环磷酰胺处理。
  • 每组10只，适应性饲养3天后开始实验，持续28天。

• 2.2 主要试剂与仪器：

  • 环磷酰胺（注射用），生理盐水，肝糖原、血乳酸（LA）、血清尿素氮（SUN）检测试剂盒，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）ELISA试剂盒。
  • 电子天平，离心机，酶标仪，恒温水浴锅，游泳玻璃缸（50cm × 30cm × 40cm），铅皮（5%体重）。

• 2.3 模型建立与给药：

  • 除空白对照组外，其余各组按“2.1”方案腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下模型。
  • 各给药组按设定剂量每日灌胃给予相应受试物或阳性药，空白组与模型组灌胃等体积生理盐水。

• 2.4 指标检测：

  • 2.4.1 负重游泳实验： 末次给药后1小时，尾部负重5%体重铅皮，置于水深30cm、水温(25±1)℃的游泳缸中，记录小鼠自游泳开始至头部完全沉没水中10秒不能浮出水面的时间（秒）。
  • 2.4.2 血清指标： 游泳实验后即刻摘眼球取血，离心分离血清。检测：
    • 乳酸（LA）：比色法。
    • 尿素氮（SUN）：脲酶法。
  • 2.4.3 肝脏组织： 颈椎脱臼处死小鼠，摘取肝脏称重，取部分肝组织匀浆后检测肝糖原含量（蒽酮法）。
  • 2.4.4 免疫器官指数： 摘取脾脏和胸腺，电子天平称重，计算脏器指数：脏器重量(mg) / 小鼠体重(g)。
  • 2.4.5 血清炎症因子： ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-10水平。

• 2.5 统计分析： 数据以Mean ± SD表示，采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析(ANOVA)，组间多重比较采用LSD法或Dunnett's T3法。P<0.05为差异具有统计学意义。

3. 结果

• 3.1 对负重游泳时间的影响：

  • 模型组小鼠负重游泳时间显著低于空白组（P<0.01），表明免疫低下导致严重疲劳。
  • 各剂量保健食品组游泳时间均显著长于模型组（P<0.05或P<0.01），其中中、高剂量组效果尤为显著，达到或接近阳性药组水平。低剂量组亦有明显改善。

• 3.2 对血清乳酸(LA)、尿素氮(SUN)及肝糖原的影响：

  • 模型组血清LA、SUN水平显著高于空白组（P<0.01），肝糖原含量显著低于空白组（P<0.01）。
  • 保健食品各剂量组能显著降低血清LA（P<0.05或P<0.01）和SUN（P<0.01）水平，并显著提高肝糖原储备（P<0.05或P<0.01），呈现剂量依赖性。高剂量组效果与阳性药组无显著差异。

• 3.3 对免疫器官指数的影响：

  • 模型组脾脏指数、胸腺指数均显著低于空白组（P<0.01），表明环磷酰胺成功造成免疫器官损伤。
  • 保健食品各剂量组能不同程度地提升脾脏指数和胸腺指数（与模型组比，P<0.05或P<0.01），尤以中、高剂量组效果显著。

• 3.4 对血清炎症因子的影响：

  • 模型组促炎因子TNF-α、IL-6水平显著升高（P<0.01），抑炎因子IL-10水平显著降低（P<0.01）。
  • 保健食品干预后，各剂量组血清TNF-α、IL-6水平显著低于模型组（P<0.05或P<0.01），IL-10水平显著高于模型组（P<0.05或P<0.01），表明其具有调节免疫炎症平衡的作用。

4. 讨论

本研究通过环磷酰胺成功构建了免疫低下小鼠模型，模型动物表现出典型的疲劳状态（游泳时间缩短）及能量代谢紊乱（LA、SUN升高，肝糖原耗竭）。同时伴随免疫器官萎缩和炎症因子失衡（促炎因子↑↑，抑炎因子↓↓）。

实验结果表明，受试保健食品能显著逆转上述异常：

1. 直接抗疲劳作用： 延长负重游泳时间是其缓解疲劳最直观的表现。
2. 改善能量代谢： 降低血清LA（减少肌肉代谢产物积累）和SUN（减轻蛋白质分解负担），增加肝糖原储备（保障机体能量供应），是其抗疲劳的重要生理基础。
3. 调节免疫功能： 有效提升萎缩的免疫器官（脾、胸腺）指数，同时纠正紊乱的炎症因子谱（降低TNF-α、IL-6，升高IL-10），表明其具有明确的免疫调节作用。

免疫功能的改善可能是其缓解免疫低下相关疲劳的关键机制。免疫功能恢复有助于减少免疫系统过度激活带来的能量消耗，降低慢性炎症反应对机体造成的代谢负担和疲劳感，打破“免疫低下-疲劳-免疫进一步受损”的恶性循环。

5. 结论

基于本研究结果，受试保健食品能够：

1. 显著延长免疫功能低下小鼠的负重游泳时间，缓解疲劳状态。
2. 有效改善与疲劳相关的能量代谢指标（降低乳酸、尿素氮，升高肝糖原）。
3. 显著改善环磷酰胺诱导的免疫功能低下，表现为提升免疫器官指数，调节炎症因子平衡（降低TNF-α、IL-6，升高IL-10）。
4. 其改善免疫功能低下所致疲劳的功效，可能与其调节免疫功能、纠正炎症失衡、优化能量代谢等多重作用密切相关。

综上所述，该保健食品具有缓解因免疫功能低下引起的机体疲劳的潜在功效，为相关人群改善疲劳状态提供了一种可行的膳食补充选择。后续研究可深入探讨其具体活性成分及作用靶点。

局限性与展望：

• 本研究为动物实验，人体效果需进一步临床试验验证。
• 疲劳机制复杂，未来可增加氧化应激、线粒体功能等相关指标检测。
• 可设置停药恢复期，观察效果的持续性。

声明：

• 本研究严格遵守实验动物福利与伦理规范，实验方案经机构动物实验伦理委员会审查批准。
• 本研究结果仅针对特定配方保健食品在实验条件下的功能评价，功效声称需严格依据法规并在注册/备案后使用。
• 保健食品不能替代药物，免疫功能严重低下或持续疲劳者应及时就医。