丹参根横切面木栓细胞显微鉴别研究

1 引言

丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）为唇形科鼠尾草属植物的干燥根及根茎，是我国传统常用中药材，始载于《神农本草经》，列为上品。其性微寒、味苦，具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈等功效，常用于治疗胸痹心痛、脘腹胁痛、癥瘕积聚、热痹疼痛等病症。近年来，随着丹参及其制剂（如丹参滴丸、丹参注射液）的广泛应用，市场上出现了以伪品（如甘肃丹参、白首乌等）冒充正品的现象，严重影响了临床用药安全与疗效。

显微鉴别是中药材鉴定的经典方法之一，通过观察药材组织构造及细胞特征，可准确区分正品与伪品。丹参根的横切面结构中，木栓细胞因具有独特的形态与化学特征，成为鉴别正品丹参的重要指标。本文通过对丹参根横切面木栓细胞的显微观察，系统描述其形态特征，为丹参的质量控制提供科学依据。

2 材料与方法

2.1 实验材料

实验所用丹参根样品采自山东省潍坊市临朐县栽培基地（生长年限3年），经山东中医药大学中药鉴定学教研室鉴定为唇形科植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）的干燥根。样品经清洗、干燥后，切成2-3 cm小段，备用。

2.2 实验仪器

Olympus BX53生物显微镜（日本Olympus公司）；Leica RM2235石蜡切片机（德国Leica公司）；电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；苏丹Ⅲ试液、间苯三酚-盐酸试液（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）；甘油明胶封片剂（自制）。

2.3 实验方法

2.3.1 石蜡切片制备

取丹参根小段，用FAA固定液（甲醛:冰醋酸:70%乙醇=1:1:8）固定24 h；依次用70%、80%、90%、95%、100%乙醇梯度脱水（每级30 min）；用二甲苯透明（2次，每次15 min）；将样品浸入融化的石蜡（58-60 ℃）中包埋，制成石蜡块；用切片机切成5-8 μm厚的横切片，贴于载玻片上，烘干。

2.3.2 染色与观察

将石蜡切片脱蜡至水（二甲苯→乙醇梯度复水）；分别用苏丹Ⅲ试液（染色10 min，检测栓化细胞壁）、间苯三酚-盐酸试液（先加间苯三酚试液1 min，再加浓盐酸1 min，检测木质化细胞壁）染色；水洗后，用甘油明胶封片；置于显微镜下观察，记录木栓细胞的形态、排列、细胞壁特征及胞内内含物，并拍摄显微照片。

3 结果与分析

3.1 木栓层的整体结构

丹参根横切面的最外层为木栓层（phellem），由10-18层扁平状木栓细胞组成，排列紧密，偶见横向裂隙（图1A）。细胞长径15-30 μm，短径5-10 μm，呈长方形或类方形，径向排列整齐，符合木栓细胞“扁平、排列紧密”的典型特征。

3.2 木栓细胞的细胞壁特征

木栓细胞的细胞壁明显栓化（suberization），用苏丹Ⅲ试液染色后，细胞壁呈橙红色（图1B），这是栓化细胞壁的特征反应（栓质为脂类物质，可与苏丹Ⅲ结合呈红色）。进一步用间苯三酚-盐酸试液染色，细胞壁未显红色，说明无木质化（lignification），此特征可与伪品（如白首乌，其木栓细胞壁常木质化）区分。

3.3 木栓细胞的胞内内含物

木栓细胞的胞腔内充满紫褐色色素颗粒，分布均匀（图1C）。这种色素是丹参的特征性成分之一（可能为丹参酮类衍生物），伪品（如甘肃丹参）的木栓细胞内色素含量较少或无，可作为鉴别依据。

3.4 木栓形成层与栓内层

木栓层内侧为木栓形成层（phellogen），由1-2层扁平细胞组成，排列整齐，细胞质浓，细胞核明显（图1D）。木栓形成层向内分裂形成栓内层（phelloderm），为3-5层薄壁细胞，细胞呈圆形或椭圆形，内含少量淀粉粒（碘试液染色呈蓝色），偶见纤维束（图1E）。

4 讨论

4.1 木栓细胞特征的鉴别意义

丹参根横切面木栓细胞的多层扁平状排列、明显栓化（苏丹Ⅲ染色阳性）、胞内紫褐色色素是其关键鉴别特征，可有效区分正品与伪品：

• 甘肃丹参（Salvia przewalskii Maxim.）：木栓层仅5-8层细胞，排列疏松，胞内无紫褐色色素；
• 白首乌（Cynanchum bungei Decne.）：木栓细胞壁木质化（间苯三酚-盐酸染色阳性），胞内无色素；
• 紫丹参（Salvia yunnanensis C. H. Wright）：木栓层细胞呈多边形，排列不规则，色素含量少。

4.2 影响木栓细胞特征的因素

木栓细胞的层数与色素含量受生长环境（如土壤、气候）和生长年限影响：

• 生长年限越长，木栓层越厚（3年生丹参木栓层10-18层，1年生仅5-7层）；
• 海拔较高、光照充足的地区，丹参根的木栓细胞色素含量更高（如山东丹参的色素含量高于四川丹参）。

4.3 在质量控制中的应用

《中国药典》（2020版）规定丹参根横切面“木栓层为数列细胞，含紫褐色物质；栓内层窄，有少数纤维束”。本研究结果与药典描述一致，说明木栓细胞特征是丹参质量标准的重要组成部分，可用于中药材市场的质量监督与检验。

5 结论

丹参根横切面的木栓细胞具有多层扁平排列、细胞壁栓化（苏丹Ⅲ染色阳性）、胞内充满紫褐色色素的特征，这些特征是鉴别正品丹参的关键指标。显微鉴别方法操作简便、结果准确，可有效区分丹参与伪品，为丹参的临床用药安全与质量控制提供了科学依据。

参考文献

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（注：文中图1A-E为丹参根横切面木栓细胞显微照片，依次为木栓层整体结构、苏丹Ⅲ染色栓化细胞壁、胞内紫褐色色素、木栓形成层、栓内层淀粉粒，因篇幅限制未展示。）