验证的生化测试：确保实验室结果可靠性的基石
在临床实验室诊断领域，生化测试结果是医生诊断疾病、监测疗效和评估预后的关键依据。然而，一个测试方法从研发到最终应用于临床样本分析，必须经过严格的验证过程。验证的生化测试，是指通过一系列科学实验和数据分析，充分证明该检测系统（包括仪器、试剂、校准品和操作程序）在特定实验室环境下，能够持续、稳定地产生符合预期用途的准确、可靠结果的过程。这是保障检验质量、提升患者安全的核心环节。
为何验证不可或缺？
- 质量保证的基石： 验证是实验室质量管理体系的核心要求。它提供客观证据，证明实验室有能力按照既定的性能规范（如精密度、正确度等）执行该检测项目。
- 患者安全的守护者： 不准确的检验结果可能导致误诊、漏诊、延误治疗或过度治疗，直接危害患者健康。验证是防止此类错误发生的第一道防线。
- 结果可靠性的保证： 验证确保不同时间、不同操作者、使用不同批号试剂时，实验室报告的结果具有可比性和一致性。
- 法规合规的必需： 国内外实验室认可标准（如ISO 15189）和监管机构都强制要求实验室对引入的检测方法进行验证。
验证的核心内容：性能参数的评估
验证过程需要系统评估生化测试的关键性能参数：
-
精密度： 评估检测结果的重复性和重现性。
- 批内精密度： 在相同条件下（同一批次试剂、校准品，同一操作者，短时间内）对同一样本多次重复测量，结果的变异程度。
- 批间精密度： 在不同批次（不同天、不同试剂批号、不同校准品批号、不同操作者）条件下，对同一样本进行测量，结果的变异程度。常用标准差或变异系数表示。
-
正确度： 评估检测结果与“真值”或公认参考值之间的一致程度。
- 可通过方法学比对（与已验证的参考方法或公认可靠的系统进行样本比对分析）、回收试验（向样本中加入已知量分析物，检测回收率）、分析已知值的参考物质等方式评估。
-
可报告范围： 确定检测方法能提供可靠结果的浓度区间。
- 线性范围验证： 使用一系列浓度递增的样本（通常为5-7个浓度水平），验证在特定范围内，检测结果与样本浓度是否呈线性关系。
- 检出限与定量限： 确定检测方法能可靠检测出的最低浓度（检出限）和能进行定量测定的最低浓度（定量限）。
-
分析特异性：
- 干扰评估： 验证常见的内源性（如溶血、黄疸、脂血）和外源性（如药物、抗凝剂）物质对检测结果的影响程度。
- 交叉反应评估： 验证与目标分析物结构相似的物质是否会引起交叉反应导致假阳性或结果偏高。
-
参考区间验证： 对于需要判断结果是否“正常”的项目，实验室需验证制造商提供的参考区间或建立适用于本实验室服务人群的参考区间是否适用。
验证的实施步骤
- 制定验证计划： 明确验证目的、范围、待评估的性能参数、接受标准（需基于临床需求、行业标准如CLSI文件、制造商声明等）、所需样本类型及数量、统计分析方法、时间表和责任人。
- 收集样本与准备材料： 获取足够数量、类型合适（如新鲜临床样本、质控品、校准品、干扰物储备液、线性验证样本）的样本。
- 执行实验： 严格按照标准操作程序进行检测，详细记录实验条件、操作过程、原始数据。
- 数据分析： 运用统计学方法（如计算均值、标准差、变异系数、相关系数、回归分析、偏差百分比等）对收集的数据进行处理，评估各项性能指标。
- 结果判定与报告： 将评估结果与预先设定的接受标准进行比较，判断验证是否通过。形成详细的验证报告，记录验证过程、数据、分析结果、结论及任何偏差说明。
- 批准与应用： 验证报告经授权人员审核批准后，该检测方法方可正式用于临床样本检测。
验证后的持续监控：确保性能维持
验证并非一劳永逸。为确保检测系统持续处于验证状态，实验室必须进行：
- 室内质量控制： 每天使用质控品监测检测过程的精密度和正确度变化。
- 室间质量评价： 定期参与外部机构组织的比对活动，评估实验室结果与其他实验室或参考实验室的一致性。
- 定期性能评审： 定期回顾质控数据、室间质评结果、仪器维护记录等，评估系统性能是否稳定。
- 变更管理： 当检测系统发生任何重大变更（如更换主要试剂批号、仪器重要部件维修、操作程序修订）时，必须进行再验证或部分验证。
结语
验证的生化测试是现代医学实验室提供高质量诊断服务的生命线。通过系统、科学、严谨的验证流程及后续的持续监控，实验室能够最大限度地保证其出具的每一份生化检测报告都是准确、可靠、可追溯的，从而为临床医生的精准诊疗决策提供坚实的支撑，最终惠及每一位患者的健康福祉。对验证过程的持续投入与重视，是实验室专业精神与责任担当的核心体现。