一、基础代谢指标检测(糖尿病模型验证)
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血糖相关指标
- 空腹血糖(FBG):每周监测,稳定后每2周一次(糖尿病模型标准:大鼠≥16.7 mmol/L,小鼠≥11.1 mmol/L)。
- 糖化血红蛋白(HbA1c):反映长期血糖控制(采血检测,≥6.5%提示糖尿病)。
- 口服葡萄糖耐量试验(OGTT):评估胰岛素抵抗(造模后及处死前各测一次)。
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胰岛素敏感性
- 空腹胰岛素(FINS):计算HOMA-IR指数(HOMA-IR = FBG × FINS / 22.5)。
- 胰岛素耐量试验(ITT):注射胰岛素后监测血糖下降速率。
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氧化应激指标(与白内障发生直接相关)
- 血清/晶状体SOD、GSH-Px活性:反映抗氧化能力(糖尿病组常显著降低)。
- MDA含量:脂质过氧化产物(糖尿病组通常升高)。
二、晶状体混浊度评估(核心指标)
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裂隙灯显微镜检查
- 分级标准(参考LOCS III改良版):
- 0级:透明无混浊
- 1级:轻微后囊下点状混浊
- 2级:明显皮质或核性混浊(视力障碍)
- 3级:全晶状体混浊(失明)
- 检测频率:每周1次,动态记录进展。
- 分级标准(参考LOCS III改良版):
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晶状体透明度定量分析
- 光散射值测定:使用分光光度计检测405 nm吸光度(混浊度与吸光度呈正比)。
- 图像分析软件:ImageJ分析晶状体照片的灰度值(混浊区域灰度升高)。
三、晶状体组织学与生化检测
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组织病理学(HE染色)
- 皮质纤维细胞排列:糖尿病组可见细胞肿胀、空泡变性。
- 上皮细胞层厚度:糖尿病常导致上皮增生。
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晶状体蛋白变化
- 可溶性蛋白含量:Bradford法测定(糖尿病组降低,因蛋白交联沉淀)。
- AGEs(晚期糖基化终产物):荧光分光光度法检测(激发370 nm/发射440 nm)。
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凋亡相关蛋白(Western blot/免疫组化)
- Caspase-3、Bax/Bcl-2:评估晶状体上皮细胞凋亡。
- NF-κB、TGF-β:炎症与纤维化通路关键蛋白。
四、特殊功能检测(可选)
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视网膜-晶状体电生理
- ERG(视网膜电图):排除糖尿病视网膜病变干扰。
- 晶状体阻抗检测:反映离子通道功能异常。
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超声生物显微镜(UBM)
- 晶状体厚度测量:糖尿病早期可能出现水肿增厚。
五、数据分析要点
- 时间轴对比:明确白内障出现时间(STZ诱导的糖尿病大鼠通常在8-12周出现混浊)。
- 组间差异:糖尿病组 vs. 糖尿病+干预组 vs. 正常对照组。
- 相关性分析:如晶状体MDA水平与混浊分级的关联性。
参考文献示例
- Invest Ophthalmol Vis Sci. 2020;61(8):糖尿病白内障模型建立方法
- Exp Eye Res. 2019;189:氧化应激与晶状体蛋白交联
通过上述多维度检测,可全面评估糖尿病并发白内障模型的病理进展及潜在治疗靶点。建议根据研究目的选择核心指标(如机制研究侧重分子检测,药效评价优先混浊度分级)。
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