Ⅲ段生殖毒性试验：围产期与哺乳期影响的核心检测项目
Ⅲ段生殖毒性试验（围产期与哺乳期毒性研究）是药物/化学品生殖毒性评价的核心环节之一，专注于评估受试物从妊娠后期（着床后）至整个哺乳期对母体、分娩过程、哺乳行为以及子代（F1代）从出生到断奶期间发育的潜在不良影响。其检测项目设计周密，旨在揭示药物对繁殖功能的后代效应及母体-子代相互作用的复杂性。
核心检测项目详述：
一、 母体动物检测项目：
- 临床观察：
- 一般体征： 每日详细记录活动度、精神状态、被毛状况、眼/鼻分泌物、异常呼吸等。
- 毒性症状： 记录所有可见的毒性反应（如震颤、抽搐、流涎、腹泻等）及其发生时间、严重程度、持续时间。
- 死亡/濒死： 记录发生时间及可能原因。
- 体重与摄食量： 妊娠期（GD6起）和哺乳期定期称重并计算体重增量；记录摄食量变化（常与体重结合分析）。
- 分娩过程监测： 密切观察分娩开始时间、持续时间、难产迹象（如过度努责、延迟分娩）、产程是否顺利、胎盘排出情况等。
- 哺乳行为观察： 定期评估母鼠的母性行为，如筑巢质量、舔舐和哺乳幼仔的积极性、是否排斥或伤害幼仔等。
- 终末检查（通常在哺乳期结束LD21/22）：
- 大体剖检： 系统检查所有器官有无肉眼可见病变。
- 指定器官称重： 通常包括脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、子宫、卵巢等，计算脏器系数（脏器重/体重）。
- 组织病理学检查： 对大体剖检发现异常的器官及生殖器官（卵巢、子宫、乳腺）、垂体、可能的靶器官等进行显微镜下组织学评估。
二、 子代（F1代）检测项目：
- 出生时（PND 0）：
- 窝参数： 记录每窝的活产仔数、死产仔数、出生后立即死亡仔数（PND0死亡）、吸收胎/早期死亡胚胎数。计算着床数、着床前丢失率、着床后丢失率。
- 性别鉴定： 记录每窝雌雄仔鼠数量。
- 外观畸形检查： 仔细检查每只活产仔鼠有无肉眼可见的外部畸形（如颅面部畸形、肢体缺陷、脐疝、肛门闭锁等）。
- 体重： 称量每只活产仔鼠的出生体重（窝重或个体重），计算平均仔重。
- 哺乳期生长发育监测（PND 1 - 21）：
- 存活率： 每日记录仔鼠存活情况，计算离乳前存活率。
- 体重： 定期（如PND 0, 4, 7, 14, 21）称量每只仔鼠或整窝仔鼠体重，绘制生长曲线。
- 身体发育指标：
- 张耳： 记录双耳完全张开并竖立的日龄。
- 开眼： 记录双眼完全睁开的日龄。
- 出毛： 记录身体被毛完全覆盖的日龄。
- 门齿萌出： 记录上门齿和下门齿突破牙龈的日龄。
- 反射与生理功能发育：
- 平面翻正反射： 评估仔鼠仰卧位放置后翻正至俯卧位的日龄（反映神经发育）。
- 负趋地性： 记录仔鼠在倾斜平面上头部向上转动的日龄（反映神经发育）。
- 悬崖回避： 记录仔鼠在平台边缘后退回避的日龄（反映感知和运动协调）。
- 空中翻正反射： 记录仔鼠在跌落过程中调整身体以四肢着地的能力出现的日龄（反映神经肌肉协调）。
- 断奶前/断奶时（PND 21/22）：
- 体重： 记录断奶体重。
- 大体畸形检查： 对死亡或濒死的仔鼠及必要时对部分或全部仔鼠进行详细的内部大体检查，观察内脏器官有无异常（如内脏异位、器官缺失或畸形等）。有时会根据需要选择部分仔鼠进行内脏畸形检查（如Staples法或Wilson切片法）。
- 性发育指标（可选或后期进行）： 记录雌性阴道开口日龄和雄性龟头包皮分离日龄（常在Ⅲ段后继续观察或在附加研究中完成）。
- 断奶后生长发育与生殖功能评估（通常属于附加研究或结合其他试验）：
- 对F1代进行常规饲养，观察其生长发育（体重、摄食）、性成熟、行为学表现（如自发活动、学习记忆能力测试）以及最终的生殖能力测试（交配行为、受孕率、产仔表现等），以评估受试物可能导致的更远期或功能性影响。这部分常与后续的常规毒理学研究或专门的F1代繁殖试验结合进行。
三、 关键指标的计算与分析：
- 基于上述检测数据，计算一系列关键生殖毒性指标，例如：
- 母体毒性相关：体重增量、摄食量变化、死亡率、脏器系数变化、病理改变率。
- 繁殖性能相关：交配率、受孕率、平均黄体数、平均着床数、着床前丢失率、着床后丢失率、平均活胎数、活产率、死胎率。
- 子代发育相关：出生体重、哺乳期存活率、生长发育里程碑达标日龄、生理反射出现日龄、断奶体重、外观/内脏畸形率。
总结： Ⅲ段生殖毒性试验通过一套全面、递进的检测项目组合，系统地揭示了受试物对母体妊娠晚期、分娩过程、哺乳行为以及子代从出生到断奶关键生命早期阶段生长发育的潜在毒性作用。其核心价值在于评估药物对后代存活、正常形态结构和生理功能发育的影响，以及母体在围产期和哺乳期的耐受性，为评估药物对人类生殖风险提供不可或缺的关键数据。所有检测项目均严格围绕科学目的展开，确保数据的客观性和可靠性。