高脂/胆固醇/果糖饮食诱导高脂血症动物模型的建立与评价
（以大鼠/地鼠为例）
一、模型构建原理
通过长期饲喂高脂（通常脂肪供能占比40-60%）、高胆固醇（1-2%添加量）、高果糖（10-20%饮水或饲料添加）的复合饲料，干扰实验动物脂质代谢稳态，模拟人类高脂血症、胰岛素抵抗及非酒精性脂肪肝等代谢综合征特征。
二、核心检测项目
（一）基础生理指标
- 体重与摄食量
- 每周记录体重增长率、食物/饮水消耗量，评估能量摄入与肥胖发展。
- 脏器系数
- 处死后计算肝、肾、脾、附睾脂肪等脏器/脂肪组织湿重与体重比值，反映内脏肥胖程度。
（二）血清/血浆生化分析
- 血脂四项（核心诊断指标）
- 总胆固醇（TC）：胆固醇氧化酶法
- 甘油三酯（TG）：磷酸甘油氧化酶法
- 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：直接测定法或计算法（Friedewald公式）
- 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：沉淀分离法
- 脂代谢相关因子
- 游离脂肪酸（FFA）：铜试剂显色法
- 载脂蛋白：ApoB/ApoA1比值（ELISA）
- 糖代谢指标
- 空腹血糖（FBG）：葡萄糖氧化酶法
- 空腹胰岛素（FINS） & 胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）：计算公式：HOMA-IR = (FBG × FINS) / 22.5
- 口服糖耐量试验（OGTT）：灌胃葡萄糖后0/30/60/120 min血糖检测
- 肝脏功能标志物
- 丙氨酸氨基转移酶（ALT）
- 天冬氨酸氨基转移酶（AST）
（三）组织病理学检测
- 肝脏
- 油红O染色：冰冻切片染色定量肝细胞内脂滴沉积面积（ImageJ分析）。
- HE染色：评估肝细胞脂肪变性（分0-4级）、炎症浸润及纤维化程度。
- Masson染色：胶原纤维定量分析（早期纤维化筛查）。
- 主动脉/心脏
- 苏丹IV/油红O染色：主动脉弓斑块脂质沉积可视化。
- HE染色：血管壁结构完整性及炎性细胞浸润评估。
- 脂肪组织（白色/棕色）
- HE染色：脂肪细胞肥大（直径测量）、增生及巨噬细胞浸润（冠状结构）。
（四）氧化应激与炎症因子
- 血清/组织匀浆指标
- 超氧化物歧化酶（SOD）
- 丙二醛（MDA）
- 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）
- 炎症因子（ELISA）
- TNF-α、IL-6、IL-1β：评估系统性炎症状态。
三、模型评价要点
四、注意事项
- 动物品系选择：SD大鼠易诱导高TG血症，金黄地鼠胆固醇代谢更接近人类（优选动脉粥样硬化研究）。
- 造模周期：通常需8-12周，高果糖模型可能缩短至4-6周出现胰岛素抵抗。
- 动态监测：建议在造模第4/8/12周分批检测，避免终末期不可逆损伤干扰药效评价。
五、应用方向
该模型适用于：
- 降脂药物（他汀类、PCSK9抑制剂等）药效学评价
- 天然产物调脂活性筛选
- 高脂血症合并胰岛素抵抗机制研究
- 非酒精性脂肪肝病（NAFLD）向肝炎（NASH）进展的干预策略
结论：通过多维度检测血脂谱、糖代谢、组织病理及炎症氧化指标，可全面评价高脂/胆固醇/果糖饮食诱导的高脂血症模型，为代谢性疾病研究提供可靠平台。
备注：所有检测方法均基于公开的实验室标准流程，试剂选择需符合国家规范。