腹泻模型(小鼠/大鼠)

发布时间：2025-06-10 10:01:08 阅读量：7 作者：生物检测中心

腹泻模型（小鼠/大鼠）检测项目详解

一、 基础生理状态与一般指标

  1. 体重变化 (%)：

    • 方法： 定期（如每日）称量动物体重。
    • 意义： 腹泻导致脱水、食欲不振和营养吸收障碍，体重减轻是模型成功及严重程度的重要直观指标。计算特定时间点相对于初始体重的减轻百分比。

  2. 腹泻指数/评分：

    • 方法： 观察并记录笼盒内垫料情况或直接观察动物肛门区域及排泄物。
    • 评分标准 (示例)：
      • 0分： 粪便正常，成形颗粒状。
      • 1分： 粪便稍软，基本成形。
      • 2分： 粪便不成形，软便（粘附于肛门）。
      • 3分： 粪便呈糊状（肛门周围严重污染）。
      • 4分： 水样便（肛门及后肢、尾部大面积污染）。
    • 意义： 直接反映腹泻发生与否及严重程度。

二、 粪便相关定量检测

  1. 粪便含水量 (%)：

    • 方法：
      • 收集特定时间段（如4小时）的新鲜粪便。
      • 立即称重记录 湿重 (Ww)。
      • 将粪便置于烘箱中（通常60-80°C），烘至恒重。
      • 称重记录 干重 (Dw)。
      • 计算公式： 粪便含水量 = [(Ww - Dw) / Ww] × 100%
    • 意义： 量化腹泻最主要的病理特征——水分吸收障碍或分泌增加，是核心客观指标。

  2. 粪便排出量：

    • 方法：
      • 收集特定时间段（如24小时）内所有粪便。
      • 测量 **总湿重 (g) **或 总粒数。
    • 意义： 反映肠道蠕动功能和排泄频率的变化。

三、 血液生化与免疫指标

  1. 血清电解质水平：

    • 检测项目： 钠 (Na⁺)、钾 (K⁺)、氯 (Cl⁻)。
    • 方法： 采集血液，分离血清，使用全自动生化分析仪或离子选择性电极法检测。
    • 意义： 重度腹泻常导致脱水及电解质紊乱（低钠、低钾、低氯），反映脱水程度和机体稳态失衡。

  2. 血清炎症因子：

    • 检测项目： 肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、干扰素-γ (IFN-γ) 等。
    • 方法： 酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测血清中细胞因子浓度。
    • 意义： 评估腹泻模型（尤其是感染性或炎症性肠病模型）中全身性炎症反应的激活程度。

  3. 其他血清生化指标 (可选)：

    • 总蛋白 (TP)/白蛋白 (ALB)： 评估营养状况和可能的蛋白丢失性肠病。
    • 尿素氮 (BUN)/肌酐 (Cr)： 评估脱水对肾功能的影响。

四、 肠道组织病理学评估

  1. 肠道组织大体观察：

    • 方法： 解剖后观察肠道（尤其结肠）有无充血、水肿、出血点、溃疡、粘连等。
    • 意义： 初步判断肠道损伤程度。

  2. 组织病理学检查 (HE染色)：

    • 方法： 取病变明显区域（如远端回肠、结肠）固定、包埋、切片、HE染色。
    • 观察与评分 (示例)：
      • 粘膜结构破坏（绒毛缩短、脱落、融合）。
      • 隐窝结构改变（增生、扩张、脓肿）。
      • 炎症细胞浸润（种类、数量、深度：固有层、粘膜下层、肌层）。
      • 杯状细胞减少。
      • 粘膜上皮细胞损伤/坏死、脱落。
      • 水肿、充血、出血。
    • 意义： 明确肠道微观病变性质、程度和范围，是评估病理机制的关键。

  3. 组织炎症因子 mRNA/蛋白表达 (可选)：

    • 方法： RT-qPCR检测炎症因子mRNA水平；免疫组织化学 (IHC) 或Western Blot检测蛋白表达定位与水平。
    • 意义： 评估肠道局部炎症反应的分子机制。

五、 肠道功能相关指标 (可选)

  1. 肠道通透性检测：

    • 方法： (如) 灌胃给予异硫氰酸荧光素-右旋糖酐 (FITC-dextran，常用4 kDa)，一定时间后采集血清，检测荧光强度。
    • 意义： 评估肠粘膜屏障功能损伤程度，屏障破坏是某些类型腹泻的重要机制。

  2. 肠道菌群分析 (粪便16S rRNA测序)：

    • 方法： 收集新鲜粪便，提取微生物DNA，进行高通量测序分析菌群组成和多样性。
    • 意义： 评估腹泻造成的菌群失调或特定病原体感染情况，尤其在感染性腹泻模型中。

实验设计关键点：

  • 设立对照组： 必须包括正常对照组（不造模）和模型对照组（造模不给药/不给干预）。
  • 时间点： 根据模型特点（如诱导剂作用峰时间、药物起效时间）合理设置观察和检测时间点（如造模前、造模后不同时间点、干预后不同时间点）。
  • 样本量： 每组动物数量需满足统计学要求（通常n≥6-8）。
  • 伦理： 所有操作需遵循实验动物福利与伦理规范并获得许可。

总结：

腹泻模型的评估是一个多维度、多层次的过程。核心检测项目（粪便含水量、腹泻评分、体重变化、组织病理学）不可或缺。根据研究目的和模型类型，有针对性地选择血液生化（电解质、炎症因子）、肠道屏障功能、菌群分析等指标，可更全面地揭示腹泻的病理生理机制和干预措施的效果。严谨的实验设计和标准化的操作是获得可靠数据的基础。

请注意，具体检测方案需根据研究目标、模型建立方法（如化学诱导剂种类、微生物感染种类、手术方式等）和实验条件进行调整和优化。