大鼠慢性萎缩性胃炎模型检测项目详解
模型简述： 该模型常采用化学诱导法（如N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍溶液自由饮用联合饥饱失常等）建立，模拟人类慢性萎缩性胃炎病理进程。
核心检测项目
一、胃大体形态学观察
- 胃黏膜外观：
- 观测点： 胃黏膜是否粗糙、光泽度降低、色泽变淡（苍白或灰白）、血管透见度增加、皱襞变平或消失、局部糜烂或出血点。
- 方法： 手术暴露胃组织后肉眼观察并拍照记录。
二、组织病理学检测 (核心评价)
- 苏木精-伊红染色：
- 观测点：
- 炎症细胞浸润： 固有层内淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等的密度与深度（慢性炎症活动度评分）。
- 腺体改变： 腺体数量减少、排列紊乱、腺体萎缩（胃底腺主细胞、壁细胞减少/消失）、腺体囊状扩张。
- 肠上皮化生： 胃黏膜上皮被肠型上皮取代（杯状细胞出现），分型（完全型/不完全型）。
- 异型增生： 细胞异型性、结构紊乱（低级别/高级别）。
- 方法： 胃组织固定、石蜡包埋、切片、HE染色，光学显微镜下观察并依据国际标准（如OLGA系统或中国共识）进行半定量评分。
- 观测点：
- 特殊染色：
- 阿利新蓝-过碘酸雪夫染色： 特异性显示肠化生区域（杯状细胞呈蓝色）。
- 免疫组织化学染色（可选）： 标记特定细胞类型（如壁细胞H+/K+-ATP酶、主细胞胃蛋白酶原）以量化萎缩程度；或标记增殖标志物（如Ki-67）、凋亡标志物（如Caspase-3）研究细胞动力学。
三、血清学及胃液生化指标
- 血清胃蛋白酶原：
- PG I： 主要由胃底腺主细胞分泌，水平下降反映胃底腺体萎缩。
- PG I/PG II 比值： 比值显著降低是萎缩性胃炎（尤其是胃体萎缩）的敏感血清学标志。
- 方法： 酶联免疫吸附法。
- 血清胃泌素17：
- G-17主要由胃窦G细胞分泌。胃窦萎缩时G细胞减少，G-17水平降低；胃体萎缩导致胃酸减少，反馈性引起G-17升高（主要反映胃体萎缩）。
- 方法： 酶联免疫吸附法。
- 胃液分析与pH值：
- 总酸度及胃酸排出量： 壁细胞萎缩导致胃酸分泌减少。
- 胃蛋白酶活性： 主细胞萎缩导致胃蛋白酶原分泌减少，活性降低。
- 胃液pH值： 显著高于正常（低酸或无酸）。
- 方法： 收集胃液，酸碱滴定法测酸度，酶学法测胃蛋白酶活性，pH计测pH值。
四、氧化应激与炎症因子
- 胃组织匀浆指标：
- 氧化应激：
- 丙二醛：脂质过氧化产物，水平升高。
- 超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶：抗氧化酶活性常降低。
- 总抗氧化能力：可能下降。
- 炎症因子：
- 白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α：促炎因子水平升高。
- 白细胞介素-10：抗炎因子水平可能变化。
- 方法： 试剂盒（比色法/酶联免疫吸附法）检测匀浆上清液。
- 氧化应激：
五、凋亡相关蛋白检测
- Western Blot / 实时荧光定量PCR：
- 检测目标： Bax, Bcl-2, Caspase-3 等凋亡相关蛋白及mRNA表达水平（Bax/Bcl-2比值升高、Caspase-3活化增加提示凋亡过度）。
- 意义： 评估胃黏膜上皮细胞凋亡状态，与腺体萎缩密切相关。
模型成功的核心病理判定标准
- 明确腺体萎缩： HE染色镜下见胃底腺（主细胞、壁细胞）数量显著减少或消失，腺体变薄、稀疏，或伴囊状扩张。
- 肠上皮化生： 胃黏膜中出现明确的杯状细胞（阿利新蓝-过碘酸雪夫染色阳性）。
- 伴随炎症： 固有层慢性炎症细胞浸润。
- 支持性指标：
- 血清PG I降低和/或PG I/PG II比值降低。
- 血清G-17水平异常（胃体萎缩时升高）。
- 胃液分析显示低酸/无酸、低胃蛋白酶活性。
- 氧化应激指标升高，抗氧化能力下降。
- 促炎因子水平升高。
关键操作注意事项
- 取样规范性： 沿胃大弯纵向剪开，生理盐水轻柔冲洗，避免黏膜损伤。准确区分并分别取材胃窦、胃体（尤其是泌酸腺区域）组织块。
- 固定及时充分： 离体组织立即投入足量中性缓冲福尔马林固定液（>24小时），确保组织良好固定。
- 盲法评估： 病理切片阅片应由不知晓分组情况的研究人员进行，以最大限度减少偏倚。
- 指标组合： 单一指标局限性大，必须结合大体观察、HE染色（核心）、血清学（PG、G-17）进行综合判断。
通过系统检测上述项目，可全面、客观地评估大鼠慢性萎缩性胃炎模型的建立是否成功及其病变的严重程度，为深入研究该疾病的发病机制或筛选干预措施提供可靠平台。