HFD饲料诱导的脂肪肝模型(小鼠/大鼠，地鼠)

以下是为您整理的HFD饲料诱导的啮齿类动物（小鼠/大鼠/地鼠）脂肪肝模型的完整技术方案，重点围绕 检测项目 展开，内容符合学术规范且不包含任何企业信息：

高脂饲料（HFD）诱导的脂肪肝动物模型构建与检测方案

一、模型构建

1. 动物选择
   • 常用品系：C57BL/6小鼠、SD/Wistar大鼠、叙利亚地鼠
   • 分组：正常对照组（普通饲料） + HFD组（脂肪占比45%-60%的饲料）
   • 周期：通常8-16周（小鼠≥12周，大鼠/地鼠可缩短至8周）

二、核心检测项目

（一）基础表型验证

1. 体重动态监测

   • 频率：每周1次
   • 意义：评估肥胖发展程度

2. 肝脏指数（肝体比）

   • 公式：肝脏湿重(g) / 体重(g) × 100%
   • 判定：HFD组显著高于对照组（提示肝脏脂肪堆积）

（二）血清生化指标

（三）肝脏组织病理学分析

金标准检测流程：

1. 苏木素-伊红（HE）染色

   • 观察：肝细胞脂肪空泡化、气球样变、炎性浸润
   • 半定量评分（如NAFLD活动度评分系统）

2. 油红O（Oil Red O）冰冻切片染色

   • 特异性显示肝内中性脂滴（红色颗粒）
   • 定量方法：
     • 图像分析软件计算阳性面积百分比
     • 或提取染色染料进行分光光度法测定（OD值）

3. 天狼星红染色（可选）

   • 检测早期肝纤维化（胶原纤维沉积）

（四）肝脏组织生化定量

1. 肝组织匀浆脂质提取

   • 检测内容：
     • TG含量（单位：mg/g肝组织）
     • TC含量（单位：mg/g肝组织）
   • 方法：酶比色法（试剂盒通用操作）

2. 氧化应激指标

   • MDA（丙二醛）：脂质过氧化终产物
   • SOD（超氧化物歧化酶）、GSH（谷胱甘肽）：抗氧化能力

（五）分子机制检测（进阶研究）

1. Western Blot / qPCR

   • 脂合成基因：SREBP-1c, FASN, ACC
   • 脂肪酸氧化基因：PPARα, CPT1A
   • 炎症因子：TNF-α, IL-6, IL-1β
   • 纤维化标志：α-SMA, Collagen I, TGF-β

2. 免疫组化/免疫荧光

   • 定位关键蛋白在肝组织中的表达分布（如F4/80标记巨噬细胞浸润）

三、质量控制要点

1. 样本处理

   • 取肝组织迅速分装：
     • 液氮速冻（-80℃保存，用于分子检测）
     • 4%多聚甲醛固定（用于石蜡切片）
     • OCT包埋（用于冰冻切片及油红O染色）

2. 数据分析

   • 组间比较采用t检验或ANOVA（*p<0.05, **p<0.01）
   • 病理评分实行盲法评估

四、模型成功判定标准

1. 肝体比显著升高（↑30%-50%）
2. 血清ALT/AST、TG/TC显著上升
3. HE染色显示>5%肝细胞脂肪变性
4. 油红O染色阳性面积显著增加

注：地鼠模型需注意其天然脂代谢特点，建议延长HFD喂养周期至16周以上以提高脂肪肝发生率。

本方案覆盖从基础表型到分子机制的完整检测体系，可根据研究目标和经费选择必做与选做项目。建议至少完成 肝体比 + 血清ALT/TG/TC + HE染色 + 肝组织TG定量 四项核心检测以确认模型建立成功。