以下是一篇关于大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型的完整研究框架，重点聚焦于检测项目的设计与实施，适用于科研实验设计参考：
大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型建立与系统性检测方案
一、模型建立方法
造模方式： 高脂饲料（HFD）喂养法
- 配方：60% 脂肪 + 20% 果糖 + 20% 胆固醇（或商用高脂饲料）
- 周期：8~16 周（根据研究目标调整）
- 对照组：普通饲料喂养
二、核心检测项目
分层次评估肝损伤、脂质代谢、炎症与纤维化进展：
1. 基础生理指标
2. 血清学检测
检测方法：ELISA 或 比色法
3. 肝脏组织病理学（金标准）
病理评分系统：
- NAFLD活动度评分（NAS评分）
- 纤维化分期（Brunt或Kleiner系统）
4. 氧化应激与炎症指标
5. 肝纤维化相关分子
6. 脂质代谢相关基因
- qPCR检测：
SREBP-1c（脂质合成）PPARα（脂肪酸氧化）ACC,FAS（脂肪酸合成酶）
7. 肠道菌群关联分析（可选）
- 16S rRNA测序（粪便样本）
- 血清内毒素（LPS）检测
三、检测流程示意图
Mermaid四、关键注意事项
- 样本保存：
- 肝组织分装：部分冻存于 -80℃（分子实验），部分固定于福尔马林（病理）
- 标准化操作：
- 采血前禁食12小时，统一麻醉方式（如异氟烷）
- 病理盲法评估：
- 由两位病理学家独立评分，减少主观误差
- 模型验证：
- 必须满足：肝脂质沉积 > 对照组5倍 + ALT升高 + 组织学脂肪变评分≥2
五、高级技术拓展
- 活体成像：小动物MRI评估肝脏脂肪含量
- 代谢组学：LC-MS分析肝脏脂质组成
- 单细胞测序：揭示肝内免疫细胞亚群变化
通过上述系统性检测，可全面评估大鼠NAFLD模型从单纯性脂肪变（NAFL）向脂肪性肝炎（NASH）及纤维化的动态进展，为药物干预研究提供可靠平台。
参考文献：
- Kleiner et al. (2005). Hepatology - NAS评分标准
- Farrell et al. (2019). J Gastroenterol Hepatol - 动物模型指南
- 中国《非酒精性脂肪性肝病防治指南》（2023更新版）
如需完整实验方案模板或某检测项目详细Protocol，可进一步补充说明。