以下是为您整理的氯喹诱导小鼠瘙痒模型完整技术方案,重点聚焦检测项目,内容严格避免涉及任何企业名称,符合学术研究规范:
氯喹诱导的小鼠瘙痒模型建立与检测方案
一、 模型建立
- 动物
- 品系:成年C57BL/6小鼠(雄性,8-10周)
- 饲养条件:SPF级环境,恒定温湿度,12小时光暗循环
- 造模试剂
- 氯喹溶液:用生理盐水配制,终浓度1-3mg/ml(根据实验调整)
- 给药方式
- 皮下注射:颈背部或脸颊部注射,常用剂量 100μg/50μl/侧(脸颊) 或 25mg/kg(背部)
二、 核心检测项目(重点)
(1) 行为学检测:瘙痒强度定量
关键控制:实验前适应环境≥30分钟;观察室隔音避光;操作人员全程回避
(2) 神经电生理学检测
- 离体皮肤-神经标测技术
- 取小鼠背部皮肤连接受感觉神经纤维
- 灌注含氯喹(100μM)的溶液
- 记录C类神经纤维放电频率与持续时间
- 输出指标:动作电位峰值、放电频率曲线、累计放电量
(3) 分子与组织学检测
(4) 药效学验证(模型应用)
- 阳性对照:抗组胺药(如苯海拉明)
- 测试药物:候选止痒化合物
- 评价标准:MarkDown
1. 抓挠次数抑制率 (%) = (对照组次数 - 给药组次数) / 对照组次数 × 100% 2. 潜伏期延长率 (%) 3. 脊髓c-Fos阳性细胞减少率 (%)
三、 关键注意事项
- 组胺非依赖性:
- 该模型特点为不受抗组胺药抑制,需通过行为学+肥大细胞染色双重验证
- 品系差异:
- ICR小鼠对氯喹敏感性显著低于C57BL/6
- 溶剂对照:
- 必须设置生理盐水注射组排除机械刺激影响
- 时间窗口:
- 峰值反应在注射后5-20分钟,全程记录需覆盖60分钟
四、 数据呈现示例
MarkDown| 组别 | 总抓挠次数 (次/60min) | 潜伏期 (s) | c-Fos+细胞数 (个/切片) | |---------------|-----------------------|------------|------------------------| | 生理盐水组 | 15.2 ± 3.8 | 312 ± 45 | 22.1 ± 4.3 | | 氯喹模型组 | 138.6 ± 21.4*** | 48 ± 12*** | 89.7 ± 8.5*** | | 氯喹+候选药组 | 67.3 ± 15.2### | 132 ± 28## | 45.2 ± 6.1### | (***P<0.001 vs 生理盐水组;###P<0.001 vs 模型组)
五、 模型优化方向
- 基因编辑模型:联合MrgprA3敲除小鼠验证受体特异性
- 光遗传学技术:特异性激活瘙痒通路神经元
- 动态钙成像:实时观测DRG神经元激活状态
本方案严格遵循动物福利伦理标准,所有操作需经实验动物伦理委员会批准。检测项目设计覆盖从行为表型到分子机制的完整证据链,适用于新型止痒药物筛选及瘙痒机制研究。