血清病肾炎模型（大鼠）实验指南：检测项目详解
一、肾功能与尿检指标（核心评估肾小球滤过功能）
- 24小时尿蛋白定量 (24h Urinary Protein Excretion)：
- 方法： 代谢笼收集尿液，考马斯亮蓝法或BCA法检测。
- 意义： 最直接反映肾小球滤过屏障损伤程度的关键指标。模型中显著升高提示蛋白尿形成。
- 血清肌酐 (Serum Creatinine, SCr) 和 血尿素氮 (Blood Urea Nitrogen, BUN)：
- 方法： 取血清，酶法或苦味酸法检测。
- 意义： 评估肾小球滤过功能（GFR）。升高提示肾功能减退或衰竭（通常在严重损伤时显著）。
二、肾脏组织病理学检查（金标准，观察病变部位与程度）
- 光镜检查 (Light Microscopy, HE/PAS/PASM/Masson染色)：
- 肾小球： 观察内皮/系膜细胞增生程度、毛细血管襻结构（挤压、塌陷、微血栓）、白细胞浸润、基膜增厚、新月体形成。
- 肾小管： 变性、萎缩、坏死、管型形成（蛋白管型、细胞管型）。
- 间质： 炎性细胞（单核/淋巴/中性粒）浸润、水肿、纤维化。
- 血管： 血管壁病变。
- 免疫荧光检查 (Immunofluorescence, IF)：
- 目标： 检测肾小球内免疫复合物沉积。
- 指标： IgG（主要组分）、补体C3、IgM沉积。
- 模式： 沉积部位（系膜区、毛细血管壁）、形态（颗粒状、线状）、强度。
- 透射电镜检查 (Transmission Electron Microscopy, TEM)：
- 目标： 观察超微结构病变及沉积物精确定位。
- 重点： 肾小球内电子致密物沉积的部位（上皮下、内皮下、系膜区）、足细胞（足突融合、微绒毛化）、基膜形态（增厚、断裂）、内皮细胞病变。
三、免疫学与炎症指标（反映疾病发生机制）
- 循环免疫复合物 (Circulating Immune Complexes, CIC)：
- 方法： ELISA法检测血清中抗原-抗体复合物水平。
- 意义： 模型发病的核心环节，其水平与肾损伤程度常相关。
- 补体系统：
- 血清总补体活性 (CH50)： 评估经典途径整体活性，模型中常降低（补体消耗）。
- 血清补体成分 (如 C3, C4)： ELISA检测，下降提示补体活化消耗。
- 血清特异性抗体：
- 方法： ELISA法检测大鼠血清中针对外源抗原（如BSA）的特异性抗体（IgG, IgM）水平。
- 意义： 反映宿主体液免疫应答强度，是形成CIC的前提。
- 肾脏局部炎症因子：
- 方法： ELISA法检测肾组织匀浆液或免疫组化/原位杂交。
- 指标： TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1、TGF-β等促炎/促纤维化因子表达水平升高。
- 肾脏局部炎症细胞浸润：
- 方法： 免疫组化或免疫荧光染色。
- 指标： 巨噬细胞（如CD68+/ED-1+）、T细胞（如CD3+）、中性粒细胞（如MPO+）等在肾小球和肾间质中的浸润数量与分布。
四、其他相关生化指标（辅助评估整体状态）
- 血清白蛋白 (Serum Albumin)： 降低可能反映蛋白尿丢失和/或肝脏合成功能影响。
- 血脂： 部分模型可能伴有继发性血脂异常。
- 其他： 根据实验设计需要检测肝功指标等。
关键实验设计注意事项：
- 分组： 必须有正常对照组（未建模）与模型组。
- 时间点： 根据实验目的设置多个观察时间点（如建模后7天、14天、21天），以观察疾病进程。
- 样本采集： 尿液、血液、肾脏组织需按计划规范采集与处理（如固定、冷冻）。
- 抗原准备： 使用高纯度牛血清白蛋白（BSA）或卵白蛋白（OVA），需经去热原处理。初次免疫剂量与方式（如弗氏完全佐剂）、加强免疫剂量与频率是模型成功的关键变量。
- 动物品系： 常用SD或Wistar大鼠。
总结： 大鼠血清病肾炎模型的评估是一个多维度、多层次的过程。肾功能（蛋白尿、SCr/BUN）和组织病理学（光镜、免疫荧光、电镜）是核心评价指标。 免疫学指标（CIC、补体、特异性抗体） 阐释发病机制，炎症因子与浸润细胞 反映肾脏局部炎症状态。综合这些检测结果，才能全面、客观地评价模型建立的成功与否、肾损伤的严重程度及相关干预措施的治疗效果。
注： 文中提及的实验方法（如考马斯亮蓝法、ELISA、HE染色等）均为通用的标准技术，不涉及任何特定厂商或品牌。