角叉菜胶致足趾疼痛模型(小鼠/大鼠)

发布时间:2025-06-10 08:19:14 阅读量:4 作者:生物检测中心

以下是关于角叉菜胶诱导足趾疼痛模型(小鼠/大鼠) 的完整技术方案,重点聚焦于检测项目,内容严格遵守学术规范,不涉及任何企业名称:

角叉菜胶致足趾疼痛模型实验方案

模型机制 角叉菜胶(Carrageenan)是一种经典的非感染性炎症诱导剂,通过皮下注射至啮齿类动物后足趾,激活TLR4/NF-κB通路,引发局部炎症反应(红肿、发热)、痛觉过敏(Hyperalgesia)和触诱发痛(Allodynia),峰值效应出现在注射后3–6小时

核心检测项目

1. 机械性痛阈检测(机械性触诱发痛)

  • 检测工具: von Frey纤毛(一系列不同力度的尼龙纤维,力度范围:0.008–15g)
  • 检测方法
    • 动物置于底部为金属网孔的透明观察箱,适应环境≥30分钟。
    • 纤毛垂直刺激后足趾跖面(避开注射点),每次刺激持续1–2秒。
    • 记录引起缩足反应的最小力度(50%缩足阈值,采用Dixon’s up-down法计算)。
  • 关键指标: 50% Paw Withdrawal Threshold (PWT, g)

2. 热痛敏感性检测(热痛敏)

  • 检测工具: 热辐射仪(如Hargreaves法)
  • 检测方法
    • 动物置于玻璃台面,热源聚焦于后足趾跖面。
    • 记录从热刺激开始到动物缩足的潜伏期(秒)。
    • 设自动切断阈值(小鼠≤12秒,大鼠≤20秒)防止组织损伤。
  • 关键指标: Paw Withdrawal Latency (PWL, s)

3. 炎症程度量化

  • 足趾肿胀度测定
    • 工具:电子游标卡尺或足趾容积测量仪。
    • 方法:测量注射部位足趾厚度(mm)或容积(mL),计算注射前后差值。
    • 指标:足趾厚度变化率(%) 或 容积增加量(mL)
  • 炎性介质分析(可选)
    • 取局部组织匀浆,ELISA检测 TNF-α、IL-1β、PGE₂ 等促炎因子浓度。

4. 自发痛行为评估

  • 负重不对称性检测
    • 工具:动态负重测试系统(测力平台)。
    • 方法:测量双后肢负重比例,计算患肢负重下降率(%)。
  • 自发保护行为评分
    • 观察动物是否出现舔舐、悬抬患肢等行为(0–3分:0=无行为;3=持续悬抬)。

实验流程标准化要点

  1. 动物分组
    • 空白对照组(未处理)、溶剂对照组(生理盐水注射)、模型组(角叉菜胶注射)、药物干预组(根据研究设计)。
  2. 角叉菜胶注射
    • 浓度:1–3% (w/v) 溶于无菌生理盐水。
    • 注射体积:小鼠(50μL/足),大鼠(100μL/足)。
    • 部位:后足趾跖面皮下。
  3. 检测时间窗
    • 基线值(注射前)→ 注射后1h、3h、5h、24h(根据研究目的调整)。

数据统计与结果解读

注意事项

  1. 环境控制:测试室温维持22–25℃,避免噪音干扰。
  2. 盲法设计:行为学检测人员需对分组信息未知。
  3. 伦理合规:所有操作需通过动物伦理委员会审批。

本方案聚焦疼痛与炎症的客观量化指标,适用于镇痛药物筛选、炎症机制研究等场景,可高效评估干预措施的效应强度与时效特征。