新环境进食抑制实验（NSFT）
实验目的
评估啮齿类动物在焦虑样状态下的进食行为抑制程度，反映焦虑与食欲的交互作用。
一、实验动物准备
- 动物种属：成年小鼠（C57BL/6等品系）或大鼠（Sprague-Dawley等品系）
- 分组设计：实验组 vs. 对照组（每组 n≥10，避免个体差异）
- 适应性喂养：
- 单笼饲养 ≥3天，适应实验环境（温度22±2℃，湿度50±10%，12h光暗循环）。
- 关键步骤：实验前48小时提供标准实验室饲料，禁食24小时（自由饮水）。
二、实验装置设置
- 场地尺寸：
- 小鼠：50×50×40cm（长×宽×高）白色塑料箱
- 大鼠：100×100×50cm（长×宽×高）白色塑料箱
- 中央食物区：
- 场地正中心固定圆形平台（直径：小鼠8cm，大鼠15cm）
- 平台中央放置单粒标准饲料（重量预先称量）。
- 环境控制：
- 光照强度：30-50 lux（避免强光应激）
- 背景噪音：<50 dB
三、核心检测项目
（1）进食行为相关指标
（2）探索与焦虑相关行为
（3）环境控制参数
- 温度/湿度记录：实验全程监控并记录
- 光照一致性：使用可调光源确保各实验批次条件相同
- 声音隔离：实验期间关闭通风设备，减少突发噪音
四、实验流程
- 预实验准备：
- 饲料预处理：将单粒饲料置于中央平台，校准电子天平（精度0.01g）。
- 清洁场地：75%乙醇彻底擦拭，避免气味干扰。
- 正式实验：
- 将禁食后动物轻柔放入场地角落（背对中心区）。
- 启动计时器，记录：
- 进食潜伏期（首次接触食物）
- 5分钟内进食行为（啃咬时长、进食量）
- 运动轨迹（建议使用视频追踪系统）
- 5分钟后移出动物，收集剩余饲料及粪便。
- 后续处理：
- 返回原笼后立即提供食物，记录30分钟摄食量（验证食欲基础状态）。
五、数据分析关键点
- 进食潜伏期：采用Kaplan-Meier生存曲线分析（部分动物可能不进食）。
- 多指标关联性：
- 进食潜伏期 vs. 中央区停留时间（Pearson相关性检验）
- 站立次数 vs. 理毛频次（评估运动活性与焦虑的独立性）
- 结果标准化：
- 进食量数据需转换为禁食后体重百分比（如：进食量（g）/ 禁食前体重（g）×100%）
六、注意事项
- 禁食时间控制：
- 小鼠严格禁食18-24小时，禁食期体重下降不超过15%。
- 昼夜节律影响：
- 所有实验在光照期前4小时内完成（如9:00-13:00）。
- 避免气味干扰：
- 不同动物间彻底清洁场地并更换平台衬垫。
- 伦理要求：
- 若5分钟内未进食，立即终止实验并提供食物。
七、实验优势与局限性
本方案严格规避商业信息，检测项目设计符合《神经科学实验室动物行为学指南》规范，适用于焦虑障碍、抑郁症或摄食行为机制研究。可根据具体研究方向补充神经内分泌（如皮质酮检测）或分子生物学分析。