DBTC尾静脉注射慢性胰腺炎(大鼠)

DBTC尾静脉注射诱导大鼠慢性胰腺炎模型及检测方案

一、模型建立

1. 动物与分组

   • SD/Wistar大鼠（雄性，200-250g），随机分为：
     • 对照组（生理盐水尾静脉注射）
     • DBTC组（20-25mg/kg DBTC溶于无水乙醇/甘油尾静脉注射）

2. 造模方法

   • 严格无菌操作，固定大鼠，酒精消毒尾部，缓慢注射DBTC溶液（注射后观察30分钟以防急性反应）。

二、核心检测项目与时间点

1. 胰腺组织病理学（金标准）

• 检测时间：造模后7、14、28天分批取材
• 方法：
  • HE染色：评估炎症细胞浸润、腺泡萎缩、纤维化程度（半定量评分，如Schmidt标准）。
  • Masson三色染色：胶原纤维沉积定量（ImageJ分析蓝色区域占比）。
  • 免疫组化：α-SMA（肌成纤维细胞活化）、TGF-β1（纤维化标志物）。

2. 血清生化指标

• 检测时间：造模前、造模后3/7/14/28天
• 指标：
  • 淀粉酶/脂肪酶：急性期升高（早期胰腺损伤）。
  • IL-6、TNF-α（ELISA）：系统性炎症水平。

3. 胰腺功能评估

• 粪便弹性蛋白酶-1（ELISA）：外分泌功能下降提示慢性化。
• 口服葡萄糖耐量试验（OGTT）：内分泌功能（慢性胰腺炎可继发糖尿病）。

4. 影像学检查（可选）

• 超声/微CT：胰腺体积缩小、回声增强（纤维化特征）。

5. 分子机制检测

• qPCR/Western Blot：
  • 纤维化相关基因（Collagen I/III, Fibronectin）。
  • 炎症通路（NF-κB, NLRP3）。

三、数据分析

• 病理评分采用Kruskal-Wallis检验，生化指标用ANOVA，以p<0.05为显著性标准。

四、注意事项

1. DBTC需避光保存，现配现用。
2. 尾静脉注射失败可能导致胰腺损伤不均一，需排除技术误差。
3. 慢性期（>14天）重点关注纤维化而非急性坏死。

五、参考文献

1. 经典DBTC模型文献（如《Pancreas》期刊方法学论文）。
2. 胰腺纤维化评分标准（Schmidt et al.）。

如需具体实验步骤或某检测技术的详细Protocol，可进一步补充说明。