以下是大鼠过敏性结膜炎（Allergic Conjunctivitis, AC）模型的完整研究框架，重点突出检测项目，内容严格遵循学术规范，不涉及任何企业或商业信息：

大鼠过敏性结膜炎（AC）模型研究方案

一、模型建立

致敏原：卵清蛋白（OVA）联合氢氧化铝佐剂 致敏方式：腹腔注射（第0、7天） 激发方式：局部滴眼（第14天起） 对照组：生理盐水处理组（同步操作）

二、核心检测项目

（一）临床症状评估

1. 眼部抓挠次数

   • 方法：视频记录激发后30分钟内大鼠前爪接触眼周区域次数
   • 意义：直接反映瘙痒程度（核心症状）

2. 眼部体征评分（双盲法评估）

   • 评分标准：

（二）炎症介质检测

1. 泪液样本分析

   • 采集：毛细管吸取法收集激发后1小时泪液
   • 检测指标：
     • 组胺（HIST）
     • 类胰蛋白酶（Tryptase）
     • 白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-13

2. 结膜组织匀浆检测

   • 指标：
     • 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）
     • 肿瘤坏死因子（TNF）-α
     • 环氧合酶（COX）-2

（三）组织病理学分析

1. HE染色

   • 观察重点：
     • 结膜上皮层嗜酸性粒细胞/中性粒细胞浸润数量
     • 基质层血管扩张及水肿程度
   • 评分标准：0-3分（无浸润→重度浸润）

2. PAS染色

   • 检测目的：杯状细胞增生程度（过敏性结膜炎特征病变）
   • 方法：计数每毫米结膜上皮杯状细胞数量

3. 免疫组化

   • 靶标蛋白：
     • 肥大细胞标志物（如类胰蛋白酶）
     • Th2细胞标志物（如GATA-3）

（四）免疫学指标

1. 血清OVA特异性IgE

   • 方法：ELISA法检测致敏后第14天血清

2. 结膜肥大细胞活化检测

   • 方法：甲苯胺蓝染色计数结膜脱颗粒肥大细胞比例

三、关键时间节点检测设计

四、模型验证要点

1. 特异性验证：
   • 对照组无炎症反应
   • OVA特异性IgE显著升高（>生理盐水组3倍）
2. 可重复性标准：
   • 激发后1小时抓挠次数 >15次/30分钟
   • 结膜嗜酸性粒细胞浸润评分 ≥2分

五、注意事项

1. 眼部激发需避免损伤角膜（使用钝头滴管）
2. 泪液采集前禁用麻醉药物（影响分泌量）
3. 组织取材后立即固定（推荐4%多聚甲醛）

本方案涵盖AC模型的核心评价维度，通过行为学-分子-组织病理三级验证确保结果可靠性，适用于药物筛选及机制研究。实际操作需遵循所在机构动物伦理委员会批准的操作规程。