LPS诱导的脓毒血症（小鼠）

以下是关于LPS诱导小鼠脓毒血症模型的完整技术方案，重点聚焦于检测项目设计，内容严格避免涉及任何企业名称：

LPS诱导小鼠脓毒血症模型构建及多维度检测方案

一、模型建立

• 诱导剂：脂多糖（LPS，血清型O55:B5或O111:B4）
• 给药途径：腹腔注射（i.p.）
• 剂量范围：5–20 mg/kg（依据预实验确定半数致死量LD₅₀）
• 对照组：
  • 空白对照组（生理盐水）
  • 假手术组（如涉及手术）

二、核心检测项目体系

(一) 系统性炎症反应评估

1. 血清炎症因子谱（关键指标）

   • 检测方法：ELISA / Luminex多因子检测
   • 靶标：
     • 促炎因子：TNF-α, IL-6, IL-1β
     • 抗炎因子：IL-10
     • 趋化因子：MCP-1, KC/CXCL1

2. 免疫细胞动态分析

   • 流式细胞术检测：
     • 全血/脾脏单细胞悬液中中性粒细胞（CD11b⁺Ly6G⁺）、单核巨噬细胞（CD11b⁺F4/80⁺）比例
     • T细胞亚群（CD4⁺/CD8⁺）及活化标志物（CD69, CD25）

(二) 器官功能损伤评估

1. 肝脏功能

   • 血清生化指标：ALT、AST、总胆红素（TBIL）
   • 肝脏组织病理（H&E染色）：
     • 肝小叶结构破坏
     • 肝细胞水肿/坏死
     • 炎性细胞浸润

2. 肾脏功能

   • 血清生化指标：肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）
   • 肾脏组织病理：
     • 肾小管上皮细胞空泡变性
     • 管型形成
     • 间质炎性浸润

3. 肺损伤

   • 肺湿/干重比（评估肺水肿）
   • 组织病理：
     • 肺泡壁增厚
     • 肺泡腔出血/渗出
     • 中性粒细胞聚集

(三) 凝血功能障碍评估

• 凝血指标：
  • 凝血酶原时间（PT）
  • 活化部分凝血活酶时间（APTT）
  • 血小板计数（PLT）

(四) 氧化应激与组织损伤标志物

• 血清/组织匀浆检测：
  • 丙二醛（MDA，脂质过氧化产物）
  • 超氧化物歧化酶（SOD）活性
  • 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性

(五) 生存率与行为学观察

• 生存分析：记录72小时内生存曲线（Log-rank检验）
• 疾病严重度评分：

三、检测时间点设计

• 早期反应：LPS注射后2–6小时（细胞因子峰值）；
• 器官损伤期：12–24小时（病理变化高峰）；
• 预后评估：48–72小时（生存率/恢复状态）。

四、数据分析要点

1. 炎症风暴强度：TNF-α、IL-6早期升高幅度与死亡率正相关；
2. 多器官损伤关联性：ALT/AST与肝病理评分、Cr/BUN与肾小管坏死程度需交叉验证；
3. 凝血-炎症交叉：PT延长与IL-6水平联合分析脓毒症DIC风险。

五、技术流程图

本方案通过炎症应答强度→器官功能损伤→生存预后三层级检测体系，实现对LPS脓毒症模型的全面评价，适用于发病机制研究及药物干预效应评估。所有检测方法均基于标准实验室技术，具有可重复性与临床转化参考价值。